Vliv fibrátů na ukládání tuku do buněk trávicí soustavy

Klára KOVAŘÍKOVÁ

Bakalářská práce

Influence of fibrates on storing fats in cells of digestive system

Anotace:

Tato bakalářská práce se zabývá vlivem fibrátů na ukládání tuku v lidských buňkách trávicího systému a následnou aplikací inhibitoru PIP5K1C. V teoretické části jsou blíže popsány lipidy a onemocnění spojená s jejich nadměrným ukládáním v buňce. Také je shrnuta nejčastěji používaná medikace a potenciální nové cesty ovlivnění přes signální dráhu PI3K. Dále je uvedena specifikace použitých buněčných linií a bližší popis střevních a jaterních buněk. Praktická část popisuje experimenty na buněčných liniích střevních (HT-29) a jaterních (HepG2) buněk. Buňky byly inkubovány se dvěma fibráty ve dvou koncentracích a v kombinaci s inhibitorem PIP5K1C. Poté byla měřena viabilita buněk a metodou In-Cell ELISA relativní exprese PIP5K1C a produkt její aktivity PIP2. Množství uloženého tuku v buňkách bylo detekováno spektrofotometricky po specifickém histologickém barvení a následně porovnáno s výsledky měření po použití inhibitoru. Kvantifikace lipidové složky v buňkách zahrnovala také pořízení mikrofotografií po histologickém barvení buněk. Bylo pozorováno vyšší množství lipidové složky po použití obou fibrátů i v kombinaci s inhibitorem PIP5K1C. Při měření relativní exprese PIP5K1C bylo pozorováno snížení exprese po použití inhibitoru, ne však ve všech případech. Naopak produkt aktivity PIP5K1C, PIP2 byl snížen ve všech případech použití inhibitoru PIP5K1C. Výsledky této práce mohou lépe osvětlit fungování nových potenciálních léčiv a jejich případné nežádoucí účinky.

Abstract:

This bachelor thesis deals with the effect of fibrates on fat deposition in human digestive system cells and subsequent application of PIP5K1C inhibitor. In the theoretical part, lipids and diseases associated with their excessive deposition in the cell are described in more detail. Also, the most commonly used medication and potential new pathways of influence via the PI3K signaling pathway are summarized. The specification of the cell lines used and a more detailed description of intestinal and hepatic cells are also provided. The practical part describes experiments on intestinal (HT-29) and hepatic (HepG2) cell lines. Cells were incubated with two fibrates at two concentrations and in combination with the inhibitor PIP5K1C. Cell viability and relative expression of PIP5K1C and its activity product PIP2 were then measured by In-Cell ELISA. The amount of stored fat in the cells was detected spectrophotometrically after specific histological staining and then compared with the results measured after inhibitor treatment. Quantification of the lipid component in the cells also involved taking microphotographs after histological staining of the cells. A higher amount of lipid component was observed after the use of both fibrate and in combination with the PIP5K1C inhibitor. When measuring the relative expression of PIP5K1C, decreases in expression were observed after the use of the inhibitor, but not in all cases. In contrast, the product of PIP5K1C activity, PIP2, was reduced in all cases of PIP5K1C inhibitor use. The results of this work may shed more light on the functioning of new potential drugs and their possible side effects.

Klíčová slova

fibráty, lipidy, jaterní buňky, střevní buňky, dyslipidémie

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 23. 4. 2025

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Kateřina Koubová

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Molekulární a buněčná biologie / Molekulární a buněčná biologie