Hodnocení intervalu šedé zóny pro interpretaci výsledků screeningu anti-HCV protilátek u dárců krve

Bc. Iveta Žilincová

Bachelor's thesis

The evaluation of gray zone interval for interpretation of results on anti-HCV antibodies screening in blood donor

Abstract:

The theme of the bachelor thesis is the evaluation of gray zone interval for interpretation of results of anti-HCV antibodies screening of blood donations. Every blood donor has to be tested for infectious markers according to the ordinace number 143/2008 sb. Therefore a safety of the transfusion product is increased. The objective of the bachelor thesis is to evaluate current predetermined limit of gray zone for interpretation of results on anti-HCV antibodies screening in samples of blood donors and develop an overview of frequently reactive results of blood donors of TTO FN Brno between years 2010-2016. Another objective is analyze values of cut-off index reactive results in gray zone, above a limit of reactivity and evaluate the result of confirmed examination which was accomplished in NRL SZÚ Praha. The bachelor thesis deals with basic selection criteria for blood donors, hemotherapy and its risks, screening of blood donors for infecious markers and about procedures after cut-off or reactive results in HCV. Department of TTO FN Brno uses a method ARCHITECT anti-HCV and the principle of this method is also described. This method is a two-step immunoassay, which uses chemiluminiscent microparticle immunoassay technology for the qualitative detection of anti-HCV in human serum and plasma. ARCHITECT anti-HCV analyser gives a result based on a ratio of the optical density and cut-off S/CO value. The value of cut-off is determined arbitrary and used for distinction between positive and negative results. Around cut-off value is a gray zone, which includes false negative and false positive results as well as actual negative and positive results. Department of TTO FN Brno uses the range from 0,80 to 0,99 for the gray zone. Between years 2010 and 2016 were eliminated 240 blood donors because of repeatedly reactive results. The highest number of donors, 141, had their result of reactivity above 1. Because of result in gray zone, 99 donors were eliminated. From them, 51 donors had their result between 0,80-0,99 and 48 donors in interval 0,90-0,99. The change of the limit of gray zone according to recommendation of Společnost pro transfúzní lekářství ČLS JEP number STL2009-05 from 15th of May 2009 version 2 is not possible because predetermined hypothesis was not verified. The currently set limit of the gray zone is more suitable for ARCHITECT anti-HCV method and for detection of actually positive patients.

Abstract:

Témou tejto práce je hodnotenie intervalov šedej zóny pre interpretáciu výsledkov screeningu anti-HCV protilátok u darcov krvi. Každý darca krvi musí podľa vyhlášky č.143/2008 sb (vyhláška o ľudskej krvi) podstúpiť pri každom odbere krvi vyšetrenie infekčných markerov. Pomocou tohto vyšetrenia sa zvyšuje bezpečnosť transfúzneho prípravku. Cieľom práce je vyhodnotiť aktuálne nastavené hranice šedej zóny pre interpretáciu výsledkov screeningu anti-HCV protilátok vo vzorkách darcov krvi na TTO FN Brno, vypracovať prehľad opakovane reaktívnych výsledkov screenigu anti-HCV protilátok u darcov krvi TTO FN Brno od roku 2010 do roku 2016, analyzovať hodnotu cut-off indexu opakovane reaktívnych výsledkov v šedej zóne a nad hranicou reaktivity a následne vyhodnotiť výsledky konfirmačných vyšetrení vykonaných v NRL pre vírusové hepatitídy SZU Praha. Práca sa venuje základným kritériám pre výber darcov krvi a jej zložiek, hemoterapii a jej infekčným rizikám, screeningu infekčných markerov u darcov krvi a postupom pri hraničnom alebo reaktívnom výsledku screeningu so zameraním na infekciu vírusom hepatitídy C. Následne je popísaný princíp metódy screeningu anti-HCV protilátok ARCHITECT Anti-HCV, ktorá sa využíva na TTO FN Brno. Jedná sa o dvojkrokovú metódu, ktorá využíva chemiluminiscenčnú imunoanalýzu na mikročasticiach ku kvalitatívnej detekcii anti-HCV v ľudskom sére a plazme. Analyzátor ARCHITECT Anti-HCV poskytuje výsledok na základe pomeru optickej denzity a hodnoty cut-off S/CO. Hodnota cut-off je stanovená arbitrárne a je potrebná k odlíšeniu pozitívneho a negatívneho výsledku. Okolo tejto hodnoty sa nachádza tzv. šedá zóna, ktorá zahrňuje falošne negatívne a falošne pozitívne výsledky, ale aj skutočne negatívne a pozitívne výsledky. Na TTO FN Brno je interval šedej zóny pre screening anti-HCV protilátok u darcov krvi nastavený v intervale 0,80 - 0,99. V období od 1.1.2010 do 31.12.2016 bolo na TTO FN Brno vyradených celkovo 240 darcov krvi kvôli opakovane reaktívnym výsledkom screeningu anti-HCV protilátok. Najvyšší počet vyradených darcov krvi, a to 141, mal výsledky v intervale reaktivity > 1,00. V intervale šedej zóny 0,80-0,89 sa nachádzali výsledky 51 darcov krvi a v intervale 0,90 – 0,99 sa jednalo o 48 darcov. Zmena hranice šedej zóny na S/C0 0,90 podľa Odporučenia Spoločnosti pre transfúzne lekárstvo ČLS JEP č. STL2009-05 zo dňa 15.5.2009 verzia 2 nie je možná, a to kvôli nesplneným hypotézam, ktoré boli vytýčené na začiatku tejto práce. Aktuálne nastavená hranica šedej zóny vyhovuje metóde ARCHITECT anti-HCV a tým pádom záchytu skutočne pozitívnych pacientov.

Keywords

šedá zóna, HCV, darca krvi, marker, reaktívny

Language used: Slovak

Date on which the thesis was submitted / produced: 28. 4. 2017

Thesis defence

• Date of defence: 14. 6. 2017
• Supervisor: RNDr. Eva Křížová, Ph.D.
• Reader: RNDr. Rita Pacasová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specializations in Health Science / Laboratory Assistant