Sledování podmínek tvorby a stability imunokomplexů v chemicky různorodém prostředí

Bc. Lucie Čalová

Diplomová práce

Characterization of immunocomplexes and their stability in the chemically variable reaction liquids

Anotace:

Eluční účinky chaotropních látek a detergentů jsou využívány v celé řadě imunoanalytických metod. Tato práce se zabývá určením elučního účinku vybraných chaotropních látek a detergentů v různých reakčních podmínkách. Jako detekční systém pro sledování míry rozvolnění specifických vazeb mezi antigeny a protilátkami byla zvolena klasická sendvičová metoda ELISA v systému alfa-chymotrypsin - prasečí protilátky třídy IgG se specifitou proti alfa-chymotrypsinu. Vazebná aktivita protilátek k antigenům byla vyjádřena pomocí tzv. aviditních indexů. V závěru práce bylo ověřováno, zda efektivní eluční podmínky nepoškozují aktivitu ovlivněného alfa-chymotrypsinu. Pro toto hodnocení byl použit enzym kovalentně vázaný na magnetické částice Si-MAG Carboxyl.

Abstract:

The elution effects of chaotropic agents and detergents are broadly applied in the various immunoanalytical methods. This work is concerned with determination of elution effect of some selected chaotropic compounds and detergents under the chemically different reaction conditions. Classical sandwich-type ELISA method based on biospecific pair alfa-chymotrypsin - swine anti-chymotrypsin antibody is chosen as detection system for measuring of specific non-covalent interactions between antigen and antibody. Efficiency of biospecific interactions were determined by so-called avidity described as avidity index. At the end of the research it was verified whether the effective elution conditions could negatively influence the biological activity of released alfa-chymotrypsin. For that purposes the enzyme immobilized covalently to magnetic particles Si-MAG Carboxyl was used.

Klíčová slova

detergenty, chaotropní činidla, sendvičová ELISA, avidita, imunokomplex, chymotrypsin

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 4. 6. 2013
• Vedoucí: prof. RNDr. Zuzana Bílková, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Analýza biologických materiálů