Studium rekombinantní tetrathionanhydrolasy z chemolitotrofní sirné bakterie

Bc. Jana Podivínská

Bachelor's thesis

Study of recombinant tetrathionate hydrolase from chemolithotrophic sulfur-oxidizing bacterium

Abstract:

Tato práce se věnuje rekombinantní tetrathionanhydrolase kmene Acidithiobacillus ferrooxidans CCM 4253, který byl izolován ze Zlatých Hor. Tento enzym oxiduje jeden z nejdůležitějších meziproduktů oxidace síry, tetrathionan, který pro mikroorganismy oxidující síru slouží jako důležitý zdroj energie při biologické oxidaci minerálů. Teoretická část se zaměřuje na charakteristiku chemolitotrofních sirných bakterií rodu Acidithiobacillus. Dále metabolismem síry těchto extrémně acidofilních bakterií a jejich uplatněním v bioloužení. V rámci praktické části byla provedena optimalizace heterologní produkce rekombinantní tetrathionanhydrolasy z E. coli. Dále byly testovány postupy purifikace tohoto enzymu s využitím několika chromatografických metod. Přesto se však nepodařilo získat čistý aktivní enzym.

Abstract:

This work deals with recombinant tetrathionate hydrolase of Acidithiobacillus ferrooxidans CCM 4253, which was isolated from Zlaté Hory. This enzyme oxidizes one of the critical intermediates of sulfur oxidation, tetrathionate, which serves as an important energy source for sulfur-oxidizing microorganisms during the biological oxidation of minerals. The theoretical part focuses on the characteristics of chemolithotrophic sulfur-oxidizing bacteria of the genus Acidithiobacillus. Furthermore, the sulfur metabolism of these extremely acidophilic bacteria and their application in bioleaching. In the practical part, the heterologous production of recombinant tetrathionate hydrolase from E. coli was optimized. Furthermore, the purification of this enzyme was tested using several chromatographic methods. Still, it was not possible to obtain pure active enzyme.

Keywords

Acidithiobacillus ferrooxidans, tetrathionanhydrolasa

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 15. 5. 2019

Thesis defence

• Date of defence: 25. 6. 2019
• Supervisor: doc. RNDr. Oldřich Janiczek, CSc., Mgr. Jiří Kučera, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biochemistry