Ricinusin - nový antimikrobiální peptid z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}: třetí člen rodiny klíštěcích obranných proteinů bohatých na histidin.

Bc. Veronika DORŇÁKOVÁ

Bachelor's thesis

Ricinusin {--} a new antimicrobial peptide isolated from the hard tick \kur{Ixodes ricinus}: the third member of the tick histidine-rich defense protein family.

Anotácia:

Nový gen kódující antimikrobiální protein {--} ricinusin {--} byl charakterizován u klíštěte I. ricinus. Získaná 405 bp dlouhá cDNA obsahuje jeden čtecí rámec (135 aminokyselin), který kóduje protein velký 14.5 kDa s 19 aminokyselin dlouhou signální sekvencí. Diferenciální exprese ricinusinu byla indukována sáním u larvy, nymfy i dospělců. Výrazná exprese tohoto genu ve slinných žlázách a ve střevě ukázala, že ricinusin se podílí na širokém spektru imunitních reakcí. Analýza genomové sekvence ricinusinu neprokázala přítomnost intronů. Pro studium antimikrobiální aktivity ricinusinu a jeho účinnost proti zmíněným patogenům, včetně infekce bakterií Borrelia burgdorferi, byl za použití bakteriálního expresního systému získán rekombinantní protein. Analýza proteinové sekvence ricinusinu prokázala přítomnost unikátní HEAHEAHEA repetice a podobnost ricinusinu k antimikrobiálním peptidům (AMPs) z klíštěte Boophilus microplus a Amblyomma hebraeum se stejnými vlastnostmi. Ricinusin se tímto stal třetím členem nové rodiny klíštěcích obranných peptidů bohatých na histidin.

Abstract:

New gene encoding antimicrobial protein (ricinusin) was isolated from I. ricinus. The 405 nt cDNA fragment contained a 135 aa ORF, encoding a 14.5 kDa protein with 19 aa signal peptide. Gen Bank comparison of ricinusin showed weak similarity to a new type of histidine rich antimicrobial protein with unique HEAHEAHEA repeat from Boophilus microplus and Amblyomma hebraeum. The differential gene expression was strongly induced by blood feeding in larva, nymph and adults. The site of differential expression in salivary glands and gut indicates that ricinusin is induced as a part of broad-spectrum immune response. To study the amtimicrobial capacity of ricinusin and its capatibility in clearing Borrelia burgdorferi infections, it was expressed as a His-tagged fusion protein in bacterial expression system. Analysis of the genomic organization of ricinusin gene showed that it is intronless.

Kľúčové slová

ricinusin, antimikrobiální peptid, Ixodes ricinus, imunita klíštěte

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2008

Zverejniť od: 30. 4. 2008

Identifikátor: 8545

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 2. 6. 2008
• Vedúci: Mgr. Natalia Rudenko, Ph.D.

University of South Bohemia in České Budějovice

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biology / Biology