Kinetická a inhibiční studie beta-sekretasy pomocí kapilárně elektroforetických metod

Bc. Lucie Slezáčková

Master's thesis

Kinetic and inhibition study of beta-secretase by means of capillary eletrophoretic methods.

Abstract:

Alzheimerova choroba je neurodegenerativní onemocnění, jehož prevalence roste se stárnoucí populací. Souhrn reakcí vedoucích k jejímu vzniku je popsán tzv. teorií amyloidových plaků, která se v současnosti řadí mezi nejuznávanější, ačkoliv přesná příčina nebyla doposud plně objasněna. Podle této teorie by rozvoji nemoci mohla zabránit inhibice enzymu beta-sekretasy, která je proto v posledních letech předmětem mnoha studií s cílem nalezení specifického inhibitoru. Vhodnou technikou pro studium enzymových reakcí je kapilární elektroforéza, a to především kvůli minimálnímu množství spotřebovaného vzorku a ostatních chemikálií a vysoce účinným separacím. V předložené práci byla zavedena on‑line metoda založená na principu elektroforeticky zprostředkované mikroanalýzy, která byla validována a dále použita pro kinetickou a inhibiční studii beta‑sekretasy. Získané hodnoty parametrů odpovídají těm publikovaným v literatuře, zavedená metoda tak představuje efektivní nástroj pro aplikace při vývoji nových léčiv.

Abstract:

Alzheimer's disease is a neurodegenerative disorder. Its prevalence increases with the ageing of population. Process leading to its onset is described by the so-called amyloid plaques theory which nowadays counts among the most respected theories, although the exact cause of the disease development has not been fully clarified yet. According to this theory the inhibition of beta-secretase enzyme could prevent the development of the disease and therefore discovery of a suitable inhibitor was the subject of many studies in recent years. The capillary electrophoresis is a favorable technique for the study of enzyme activity particularly due to its minimum consumption of samples and other chemicals as well as the high efficiency of the separations. In this work an on-line method based on electrophoretically mediated microanalysis was developed. This method was thoroughly validated and then used for kinetic and inhibition studies of beta-secretase. The results obtained correspond to those reported in the literature. Therefore, it represents a promising tool in the development of new drugs.

Keywords

Alzheimerova choroba, beta-sekretasa, kapilární elektroforéza, elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza, kinetická studie, inhibiční studie, Alzheimer´s disease, beta-secretase, capillary electrophoresis, electrophoretically mediated microanalysis, kinetic study, inhibition study

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 11. 5. 2017

Thesis defence

• Date of defence: 7. 6. 2017
• Supervisor: Ing. Mgr. Roman Řemínek, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Analytical Biochemistry