Možnosti a limity RNA interference u klíštěte \kur{Ixodes ricinus}

Bc. František MUSIL

Master's thesis

Potentials and limits of RNA interference in the tick \kur{Ixodes ricinus}

Anotácia:

RNA interference byla použita při studiu funkcí chitin vázajícího proteinu (CBP) a dvou isoforem cathepsinu B (cathB1, cathB2) u klíštěte Ixodes ricinus. Byly využity dvě různé metody pro aplikaci dsRNA do klíšťat - injikace a kapilární sání. Připravená dsRNA byla použita ke zjištění vlivu RNAi na klíštěcí tkáně, které byly testovány pomocí metody RT-PCR a Western blot. Exprese CBP byla úspěšně utlumena ve slinných žlázách. Utlumení cathB1 a cathB2 ve střevě bylo méně efektivní, ale stále omezovalo sání klíšťat na hostiteli.

Abstract:

The function of chitin binding protein (CBP) and two isoforms of cathepsin B (cathB1, cathB2) were tested by using RNA interference in the tick I. ricinus. Two different methods have been used to deliver dsRNA for RNAi in ticks {--} injection and capillary feeding. The synthesized dsRNA was used to find out the impact of RNAi in the tick tissues, which were tested by RT-PCR and Western blot. The expression of CBP was successfully silenced by RNAi in the salivary glands. The silencing of cathB1 and cathB2 in the gut was less effective, but still limited tick`s ability to feed.

Kľúčové slová

RNAi, Ixodes ricinus, CBP, cathepsin B

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2009

Zverejniť od: 30. 4. 2009

Identifikátor: 10836

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 6. 2009
• Vedúci: RNDr. Petr Kopáček, CSc.

University of South Bohemia in České Budějovice

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Biology / Clinical Biology