Optimalizace kultivačních podmínek in vitro u Medicago sativa

Viktor JANOUCH

Bachelor's thesis

Optimization of "in vitro" cultivation conditions of Medicago sativa

Abstract:

Tato bakalářská práce se zabývá optimalizací sterilních kultivačních podmínek u Medicago sativa. M. sativa je trvalá fialově kvetoucí rostlina, která dnes roste téměř po celém světě v mnoha různých biotypech. Vojtěška se především využívá jako krmivo a podsev při pěstování obilovin, ale i jako modelový organismus pro genetické studie. Kultivace Medicago sativa probíhá pomocí metody zvané somatická embryogeneze. Je to proces, při kterém se vyvíjejí embrya ze somatických buněk. Hlavním cílem této práce byla kultivace vojtěšky skrze somatickou embryogenezi s modifikacemi ve sterilizaci listů, složení jednotlivých médií i samotné délky kultivace. V rámci experimentu byly použity jak kontrolní rostliny, tak i transgenní rostliny M. sativa. Pro ověření, zda se během propagace rostlinného materiálu produkují rostliny se stejnou genetickou úpravou, jsme využili analytickou techniku zvanou Western blot. Během experimentu byla provedena fotodokumentace, která mapuje průběh celé kultivace. Zjistili jsme, že kontrolním rostlinám se více dařilo při kultivaci podle původního protokolu. Naopak u transgenních rostlin byla větší úspěšnost kultivace zaznamenána po úpravě původního protokolu. Z výsledků byl navržen optimální protokol pro možné budoucí kultivace M. sativa.

Abstract:

This bachelor thesis deals with the optimization of the sterile cultivation conditions of Medicago sativa. M. sativa is a violet blossoming plant that grows almost all over the world in many different biotypes. Alfalfa is mainly used as a feed for animals and for better productivity of grain cultivation, but also as a model organism for genetic studies. Medicago sativa is cultivated using a method called somatic embryogenesis. It is a process in which embryos develop from somatic cells. The main goal of this work was the cultivation of alfalfa through somatic embryogenesis with various modifications, for example, sterilization of leaves, composition of individual media and the length of cultivation itself. The control plant and the transgenic plant of M. sativa were used in the experiment. We used an analytical technique called Western blotting to verify if we cultivate plants with the same genetic conformation. During the experiment, photographic documentation was taken. We found that control plants were better at cultivation according to the original protocol. On the other hand, transgenic plants showed better cultivation success in modified protocols. An optimal protocol for possible future cultivation of M. sativa has been proposed.

Keywords

Somatická embryogeneze, Medicago sativa

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 5. 2018

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Petra Vyplelová

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biotechnology and Gene Engineering