Farmakologické experimenty na potkanech: radiometrické stanovení enzymové aktivity UDP-glukuronyltransferasy

Bc. Eva Kotlasová

Master's thesis

Pharmacological experiments on rats: radiometric enzyme assay for UDP-glucuronyltransferase

Anotácia:

Tato diplomová práce se zabývá zjištěním změn aktivit klíčových enzymů v metabolismu thyroidních hormonů u laboratorních potkanů, v závislosti na různém farmakologickém ovlivnění pokusných zvířat. Hlavním zájmem pak bylo stanovení vlivu červeného palmového oleje, podávaného potkanům v dietě, na aktivity těchto enzymů za různého experimentálně navozeného thyroidního stavu. Monitorování thyroidního stavu zvířat bylo prováděno jednak stanovením koncentrací celkových a volných frakcí thyroidních hormonů v krevních sérech s použitím metody RIA, jednak spektrofotometrickým stanovením enzymové aktivity mitochondriální glycerolfosfát dehydrogenasy ve vzorcích izolovaných mitochondriálních frakcí jater. Ke stanovení enzymové aktivity jodothyronin UDP-glukuronyltransferasy byla použita v práci nově vyvinutá radiometrická metoda. Pro sta-novení aktivit jodothyronin dejodas byly použity v laboratoři zavedené radiometrické me-tody. Výsledky kontrolních stanovení enzymových aktivit odpovídají výsledkům již dříve získaným na pracovišti a tedy očekávaným. Nově jsme zjistili, že podávání červeného palmového oleje má mírný protektivní vliv na změny enzymových aktivit způsobených změnami thyroidního stavu, tj. potlačuje negativní účinky příliš nízkých nebo příliš vyso-kých hladin TH.

Abstract:

This thesis deals with finding changes in activities of the key enzymes of thyroid hormones metabolism in the rat, depending on different pharmacological treatments of experimental animals. The main interest was ascertainment of the effects of the administration of red palm oil in diet to the animals situated in different, experimentally adjusted thyroid statuses, on activities of these enzymes. Monitoring of thyroid statuses was performed by determination of total and free fractions of thyroid hormones in samples of blood sera, using radioimmunoanalysis and by spectrophotometric determination of the enzyme activi-ty of mitochondrial glycerolphosphate dehydrogenase in samples of isolated liver mito-chondrial fractions. The newly developed radiometric method was used for determination of the enzyme activity of iodothyronine UDP-glucuronyltransferase. Proved radiometric enzyme assays were used for determination of iodothyronine deiodinases activities. The results of determination of control enzyme activities corresponded with result formerly attained in our laboratory, so these results were confirmed. We newly found that the administration of RPO manifested moderate protective effect against changes in the measured enzyme activities, caused by the changes of thyroid statuses. It suppressed unde-sirable effects of too low or too high TH serum levels.

Kľúčové slová

Červený palmový olej, Thyroidní hormony, Jodothyronin dejodasy, UDP glukuronyltransferasy, Radiometrické stanovení enzymové aktivity.

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 4. 6. 2012
• Vedúci: doc. RNDr. Stanislav Pavelka, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Biochemistry / Analytical Biochemistry