Transformace jarního ječmene genem limen

Bc. Barbora MACÚCHOVÁ

Bakalářská práce

Transformation of limen gene into spring barley

Anotace:

Houby a plísně způsobí každoročně velké škody na hospodářsky významných plodinách, mezi které patří také ječmen. S pomocí genového inženýrství by bylo možné tyto ztráty zmírnit. Rostliny často obsahují látky působící jako ochrana proti škůdcům, bohužel šlechtěné plodiny většinou takovéto látky neobsahují v dostatečné míře, a proto se geny rezistence hledají i u nepříbuzných druhů, odkud se izolují a vkládají se například do obilnin. V této bakalářské práci se zabývám genem limen, který patří mezi antifungální peptidy a byl izolován z fazole. V rámci řešení bakalářské práce se povedlo realizovat klonovací strategii, vložit zájmový gen do klonovacího vektoru, následně jej vložit do expresního vektoru a ověřit správnost jeho vnesení. Expresní vektor se zájmovým genem a pomocným vektorem byl tranformován do Agrobacterium tumefaciens. S pomocí transformovaných bakterií byla provedena transformace nezralých zygotických embryí jarního ječmene a pomocí polymerázové řetězové reakce byla ověřena přítomnost zájmového genu v rostlinách.

Abstract:

The mould and fungi can cause damage on many economically important plants including barley. With aid of the genetic engineering it could be possible to reduce these losses. The plants often contain substances which can act as protection against pathogens. Unfortunately, cultivated crops usually do not produce such substances in adequate quantities. Because of this, we are trying to find genes of resistance in unrelated species, so we can isolate them and insert those genes into, for example, cereals. In this bachelor thesis I am working with gene called limen, which belongs into group of antifungal peptides and was isolated from bean. Within the bachelor thesis the successful cloning strategy was carried out, the gene of interest was inserted into cloning vector, then into expression vector and his correct insertion was verified. Later, the expression vector with gene of interest along with the helper vector was transformed into Agrobacterium tumefaciens. The immature barley embryos were transformed with these bacteria. The presence of gene of interest in plants was confirmed with polymerase chain reaction.

Klíčová slova

ječmen, transformace, Agrobacterium tumefaciens, biotický stres

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 31. 5. 2017
• Vedoucí: Ing. Ludmila Ohnoutková, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biotechnologie a genové inženýrství