Stanovení oxinů v biologických materiálech metodou HPLC

Bc. Petr PROCHÁZKA

Master's thesis

HPLC determination of oximes in biological samples

Anotácia:

Reaktivátory acetylcholinesterázy hrají významnou v terapii otrav způsobené organofosfáty. V současné době je testována celá řada z hlediska schopnosti prostupovat přes hematoencefalickou bariéru (HEB). Cílem této práce bylo otestovat tuto schopnost u čtyřech známých reaktivátorů {--} HI-6, K-027, K-074 a TO-032. Dávka 5%LD50 (terapeutická dávka) každého reaktivátoru byla aplikována experimentálním zvířatům (potkan Wistar rat) i.m. do pravého zadního stehna. Poté byla zvířata obětována a byl odebrán mozek a krev (plasma) pro HPLC analýzy. Mozek byl následně zmražen na -80 °C až do doby před samotnou analýzou. Koncentrace reaktivátorů byly měřeny v plasmě a čtyřech částech mozku {--} frontální kůře (FC), bazálních gangliích (BG), pontomedulární oblasti (PM) a mozečku (Ce). Pro účely experimentu bylo do jednotlivých skupin zařazeno pět zvířat. Ke stanovení koncentrací reaktivátorů v plasmě a mozku byla použita metodika HPLC-UV/VIS. Koncentrace HI-6 CFC byla vypočítána na 4,29% vzhledem k Cprům. v plazmě, CBG byla průměrně 1,9% vzhledem k Cprům. v plazmě, CPM byla průměrně 2,3% vzhledem k Cprům. v plazmě a CCe byla průměrně 1,85% vzhledem k Cprům. v plazmě. Tyto poměry byly vypočteny ze všech zjištěných koncentrací v rámci jednotlivých sledovaných částí mozku. Ostatní sledované reaktivátory nebyly v mozku kvantifikovány vůbec.

Abstract:

Reactivators of acetylcholinesterase inhibited by organophosphate inhibitors play an important role in organophosphate poisoning therapy. There are a large number of reactivators being tested for their ability of penetration through blood-brain barrier (BBB) nowadays. The main aim of this thesis is to test this ability in four well know reactivators {--} HI-6, K-027, K-074 and TO-032. The 5% lethal dose (LD50) {--} therapeutic dose - of each reactivator was i.m. (intramuscularly) applied to experimental animals (Wistar rats) into right posterior thighs. Then the animals were sacrificed and the blood (plasma) and brain were collected for HPLC analysis. Subsequently, brain and plasma were frozen at -80 °C and stored until the assay. The reactivator concentrations were measured in plasma and four parts of the brain {--} frontal cortex (FC), basal ganglia (BG), ponto-medullar part (PM) and cerebellum (Ce). There were five animals for each group used for the purpose of the experiment. The concentrations of reactivators in plasma and blood samples were measured using HPLC-UV/VIS methodology. HI-6 concentrations CFC were on the average 4.29% of Caverage in plasma, CBG were on the average 1.9% of Caverage in plasma, CPM were on the average 2.3% of Caverage in plasma, and CCe were on the average 1.85% of Caverage in plasma. These rates were counted from all concentrations within the scope of particular observed parts of the brain. All the other tested reactivators were not quantified in brain at all.

Kľúčové slová

Reaktivátory, oximy, HPLC-UV/VIS, Hematoencefalická bariéra, HI-6, K-027, K-074, TO-032

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 26. 5. 2008

Zverejniť od: 26. 5. 2008

Identifikátor: 11155

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 19. 6. 2008
• Vedúci: PharmDr. Jana Karasová

University of South Bohemia in České Budějovice

Faculty of Health and Social Studies

Master programme / odbor:
Biophysics / Crisis Radiobiology and Toxicology