Cytochemická vyšetření akvitivity nukleolů po podání genisteinu na modelovém objektu

Veronika PICMONOVÁ

Bachelor's thesis

Cytochemical examination of nucleolar activity following genistein administration to biomodel

Abstract:

V této práci byl zkoumán vliv genisteinu na proteosyntetickou aktivitu jadérek sledováním změn v jejich morfologii. Vliv genisteinu na funkci jadérek byl sledován v hemocytech experimentálního živočicha Spodoptera littoralis (Boisd.) (Lepidoptera: Noctuidae). V hemolymfě S. littoralis (Boisd.) byly nalezeny 4 typy hemocytů: granulocyty, prohemocyty, plasmatocyty a sferulocyty. Vliv genisteinu na jednotlivé typy a koncentraci hemocytů není jednoznačný. Genistein byl podáván v dávkách 0,135 mg a 0,54 mg na larvu a poté byly zkoumány změny v morfologii, počtu a velikosti jadérek s časovým odstupem 8 a 24 hodin. Dále změny v morfologii hemocytů, jejich koncentraci pomocí barvení toluidinovou modří, stříbrem, Pappenheimova panoptického barvení a Türkova roztoku. Pro hodnocení změn byl materiál zpracováván pomocí optického mikroskopu a počítačového softwaru Nis Element AR 2.30. V průběhu sledování byly po působení genisteinu zjištěny změny v počtech jadérek. Počet kompaktních jadérek a mikrojadérek se zvýšil. Naproti tomu se počet prsténčitých jadérek snížil. Plocha jadérek se zvětšila po působení nižší dávky genisteinu (0,135 mg), ale po působení vyšší dávky (0,54 mg) se naopak zmenšila. Hodnoty nukleolárního indexu zůstaly bez významnějších změn. Genistein na použitém biomodelu vyvolal změny, které z hlediska hematotoxikologie mohou být považovány za imunitní reakce.

Abstract:

This thesis deals with exploration of the effect of genistein on proteosynthetic activity of nucleoli by observing changes in their morphology. The effect of genistein on the function of nucleoli was observed in hemocytes of the experimental animal Spodoptera littoralis (Boisd.) (Lepidoptera: Noctuidae). 4 types of hemocytes were found in the hemolymph of S. littoralis (Boisduval): granulocytes, prohemocytes, plasmatocytes and spherulocytes. The effect of genistein on individual types and concentration of hemocytes is not clear. Genistein was applied in doses of 0,135 mg and 0,54 mg per larva, and subsequently changes in morphology, number and size of nucleoli were examined upon 8 and 24 hours. Furthermore, changes in morphology of the hemocytes were examined, as well as their concentration using toluidine blue staining, silver staining, panoptic staining and using the Türk{\crq}s solution. For the purpose of changes assessment, the material was processed using an optical microscope and the computer software Nis Element AR 2.30. In the course of observation, changes in the number of nucleoli were found upon application of genistein. The number of compact nucleoli and micronucleoli increased. On the contrary, the number of ring-shaped nucleoli decreased. The area of nucleoli increased upon application of lower dosage of genistein (0,135 mg); however, upon action of the higher dose (0,54 mg), it decreased, on the contrary. Nucleolar index values remained without rather significant changes. In the biomodel used, genistein evoked changes which can be viewed as immune responses from the viewpoint of hematotoxicology.

Keywords

Jadérko, genistein, Spodoptera littoralis, hemocyty, AgNOR, barvení toluidinovou modří, Pappenheimovo panoptické barvení

Language used: English

Date on which the thesis was submitted / produced: 15. 5. 2008

Accessible from:: 15. 5. 2008

Identifier: 9981

Thesis defence

• Date of defence: 24. 6. 2008
• Supervisor: prof. RNDr. Josef Berger, CSc.

University of South Bohemia in České Budějovice

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician