Vyšetření genetických predispozic pro celiakii v rodině s výskytem onemocnění diabetes mellitus 1. Typu

Klára KUČEROVÁ

Bachelor's thesis

Examination of genetic predispositions for celiac disease in a family with a history of diabetes mellitus 1. Type

Abstract:

Celiakie patří mezi autoimunitní onemocnění, které postihuje především sliznici tenkého střeva. Onemocnění je charakterizováno nesnášenlivostí gliadinu, který je součástí lepku. Intolerance vede k chronickému zánětu na sliznici tenkého střeva a tím dochází k chronickému průjmu, tukovité stolici, zvracení, únavě a v neposlední řadě také neprospívání. Diabetes melitus I. typu je autoimunitní metabolické onemocnění, které se projevuje hyperglykémií (zvýšená hladina glukózy v krvi), která je důsledkem nedostatečného účinku inzulínu. DM I. typu se může u jedince vyskytovat jako samostatné onemocnění nebo může být sdružen s jinými autoimunitními onemocněními, jako je právě celiakie. Rozvoj celiakie je podmíněn přítomností genetické predispozice, ale z větší části je ovlivněn vnějšími faktory, například enviromentálními. Genetická predispozice je vázána na alely HLA systému. Konkrétně se jedná o haplotypy HLA-DQ2 a HLA-DQ8. Onemocnění se vyznačuje rozdílnými klinickými příznaky, kvůli tomu je jeho diagnostika v některých případech velice obtížná a mnoho pacientů diagnostikováno vůbec není. Cílem teoretické části bakalářské práce bylo nastudování a následné shrnutí poznatků týkajících se onemocnění celiakie a diabetu mellitu I. typu (DMI). Z velké části se zde věnuji právě diabetu, celiakii a HLA systému. V případě celiakie jsem se zaměřila na její charakteristiku, diagnostiku, léčbu a její dědičnost. V případě diabetu jsem se zabývala jeho jednotlivými typy, léčbou a opět jeho genetickými predispozicemi. V závěru teoretické části popisuji samotný HLA systém a význam asociace DM I. typu s celiakií. Praktická část mé práce byla prováděna v genetické laboratoři GENLABS v Českých Budějovicích. Zde jsem se zabývala vyšetřením genetických predispozic k celiakii pomocí metody real-time PCR. Vyšetření je založeno na HLA typizaci rizikových alel, pomocí komerčně vyráběného kitu EliGene? Coeliac RT (DQ2, DQ8, DR4). Cílem praktické části bylo zvládnutí základních laboratorních metod jako je izolace DNA z periferní krve a bukálního stěru, měření koncentrace DNA, osvojení si metody real-time PCR, která slouží k určení rizikového HLA haplotypu a analýza získaných výsledků.

Abstract:

Celiac disease is one of the autoimmune disorders that mainly affects the mucous membrane of the small intestine. The disease is characterized by intolerance to gliadin, which forms part of gluten. The intolerance leads to chronic inflammation of the mucous membrane of the small intestine, causing chronic diarrhea, adipose feces, vomiting, fatigue, and last but not least also weight loss. Type I. diabetes mellitus is an autoimmune metabolic disease demonstrated by hyperglycemia (increased level of blood glucose) which is a result of the insufficient effect of insulin. Type I. DM can occur at individuals as an independent disease or combined with other autoimmune diseases such as celiac disease. While genetic predisposition is a condition for the development of celiac disease, the development is influenced to a greater extent by external factors, for example environmental elements. Genetic predisposition is bound to alleles of the HLA system. This concerns in particular the HLA-DQ2 and HLA-DQ8 haplotypes. Due to various clinical symptoms, it is very difficult to diagnose the disease in some cases, and many patients are not diagnosed with the disease at all. The aim of the theoretical part of the bachelor thesis is to study and then summarize findings concerning celiac disease and type I. diabetes mellitus (DM I). To a great extent, the thesis addresses the topics of diabetes, celiac disease, and the HLA system. As for celiac disease, the thesis focuses on its characteristics, diagnostics, treatment, and inheritance. In the case of diabetes, the thesis deals with its individual types, treatment and also the genetic predispositions. The conclusion of the thesis describes the HLA system itself and shows the importance of the association between the type I. diabetes mellitus and celiac disease. The practical part of the thesis was conducted in the GENLABS genetics laboratory in České Budějovice. In this laboratory, genetic predispositions to celiac disease were examined by using the real-time PCR method. The examination is based on the HLA typing of the risk alleles by means of the commercially produced EliGene? Coeliac RT kit (DQ2, DQ8, DR4). The goal of the practical part is to master the basic laboratory methods such as the DNA isolation from the peripheral blood and buccal swab, to measure the DNA concentration, to adopt the real-time PCR method that serves to determine the HLA risk haplotype and to analyze gained results.

Keywords

Celiakie, diabetes mellitus, HLA-DQ2, HLA-DQ8, HLA typizace, RT-PCR

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2019

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Dagmar Riegert Bystřická, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Sciences

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician