Analýza aktivity oxidoreduktáz a jejich interakce s cyklopentendiony a kovovými povrchy

Bc. Eva KOCIÁNOVÁ

Diplomová práce

Determination of activities of oxidoreductase enzymes and their interactions with cyclopentenediones and metal surfaces

Anotace:

Tato práce se zabývá studiem oxidoreduktáz, především thioredoxinů, což je skupina enzymů obsahující v aktivním místě tzv. CXXC motiv. Součástí práce je literární přehled zahrnující informace zejména o výskytu, funkci, struktuře a také mechanismu působení thioredoxinů. Dále jsou popsány způsoby analýzy aktivity těchto enzymů pomocí spektrofotometrických metod a využití elektrochemických metod, prostřednictvím kterých lze sledovat oxidačně-redukční přeměny oxidoreduktáz a jejich interakce s jinými látkami. Hlavní náplní experimentální části diplomové práce je analýza aktivity thioredoxinu (E. coli) s využitím insulinového testu. Velká část této práce je věnována studiu interakcí thioredoxinu s cyklopentendiony a kovovými povrchy pomocí spektrofotometrických a elektrochemických měření.

Abstract:

This diploma thesis is focused on the study of oxidoreductases, especially thioredoxins, a group of enzymes containing a CXXC motif in their active site. In the first part of this work the function, structure, mechanism of action of thioredoxines are reviewed. The next part is an overview of useful experimental tools for evaluating oxidoreductase activity, structure, function and redox properties, with the main focus on spectrophotometry and electrochemical methods. The experimental part focuses on determining the activities of thioredoxine isolated from E. coli using insulin assay, and an investigation of its interactions with low-molecular ligands cyclopentenediones and metal (amalgam) surfaces. For this purpose spectrophotometric methods and electrochemistry at mercury electrodes were used.

Klíčová slova

thioredoxin, insulinový test, elektrochemie, inhibice, cyklopentendiony

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 9. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: doc. Ing. Jan Vacek, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Bioorganická chemie a chemická biologie