Využití biosensorů pro sledování účinnosti inhibitorů cholinesteras

Bc. Petra Machovcová

Master's thesis

Application of biosensors for monitoring of cholinesterase inhibitors effectivity

Anotácia:

Tato diplomová práce se zabývala využitím biosensorů při testování účinnosti karbamátových inhibitorů cholinesteras. Mezná rychlost (Vm), Michaelisova konstanta (Km) a IC50 byly stanoveny pomocí spektrofotometrické Ellmanovy metody a elektrochemické metody (enzym byl rozpuštěn v reakční směsi, nebo imobilizován na povrchu sensoru). Byla testována vhodná metoda (adsorpce a zesíťování glutaraldehydem) a vhodný typ sensoru (Pt-AgPd/Pt a Pt-AgCl/Pt) pro imobilizaci enzymu. Získány byly rozdílné výsledky v důsledku různých reakčních podmínek a odlišných metod stanovení.

Abstract:

This thesis dealt with the use of biosensors to testing the effectiveness of carbamate cholinesterase inhibitors. Maximum rate (Vm), the Michaelis constant (Km) and the IC50 were determined using the spectrophotometric Ellman´s method and electrochemical method (enzyme was dissolved in the reaction mixture or immobilized on the surface of the sensor). Suitable method (adsorption and glutaraldehyde crosslinking) and the suitable type of sensor (Pt-AgPd/Pt and Pt-AgCl/Pt) for the immobilization of enzyme were tested. The obtained results differ for Ellman´s and electrochemical method, which is caused by different reaction conditions for both methods.

Kľúčové slová

cholinesterasy, acetylcholin, biosensory, inhibitory

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 5. 6. 2013
• Vedúci: Mgr. Šárka Štěpánková, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / odbor:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials