Heterologní exprese a funkční charakterizace proteinu cryptogeinu obsahující MYC-Tag

Bc. Zbyšek Konvica

Bachelor's thesis

Heterologous expression and characterisation of cryptogein with MYC-tag

Anotácia:

Tato bakalářská práce se věnuje využití expresního systému kvasinky Pichia pastoris k heterologní expresi a funkční charakterizaci c-myc tag značeného cryptogeinu. Cílem práce bylo naklonovat gen pro zmíněný protein v kvasince Pichia pastoris. Následně byla provedena exprese v expresních baňkách, izolace a purifikace proteinu a provedení funkční charakterizace proteinu na rostlině tabáku. Nakonec byla pomocí metody Western blotting zkoumána schopnost myc tag protilátky vázat se na značení cryptogeinu.

Abstract:

This bachelor thesis deals with using Pichia pastoris expression system for heterologous expression and functional characterisation of c-myc tagged cryptogein. The goal of this thesis was to cloned the gene for the former protein in Pichia pastoris. Subsequently expession in expression flasks was performed, followed by isolation and purification and functional characterisation of protein on a tabacco plant. Finally the abillity of c-myc tag antibody to recognised the tag of cyptogein was studied using the Western blotting.

Kľúčové slová

Pichia pastoris, cryptogein, c-myc tag, heterologní exprese, Western blotting, heterologous expression

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2016

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 13. 6. 2016
• Vedúci: doc. Mgr. Jan Lochman, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry