Optimalizace metod tkáňových kultur řepky pro využití techniky Crispr/Cas9

Bc. Jan HARENČÁK

Master's thesis

Optimisation of rapeseed in vitro cultures used for CRISPR/Cas9 technology

Anotácia:

Transformace rostlin pomocí bakterie Agrobacterium tumefaciens (podle nové nomenklatury Rhizobium radiobacter) je široce používaná metoda pro úpravu genomu u rostlin. Nicméně, různé odrůdy řepky olejky nemají vždy stejnou schopnost regenerace in vitro, která je pro transformaci klíčová. Tato práce se zabývá optimalizací regeneračního protokolu pro vybrané odrůdy řepky olejky. Z šesti testovaných odrůd úspěšně regenerovaly pouze dvě - Arabella a Obelix. Vytvořený protokol lze použít pro regeneraci bez transformace, ale je možné do něj implementovat i kroky, které transformaci pomocí A. tumefaciens umožňují.

Abstract:

Plant transformation using Agrobacterium tumefaciens bacteria (Rhizobium radiobacter, according to new nomenclature) is widely used method for plant genome editing. However, different oilseed rape varieties do not always have the same in vitro regeneration capacity, which is crucial for transformation. This work aims to optimize regeneration protocol for selected varieties of oilseed rape. Of the six varieties tested, only two regenerated successfully - Arabella and Obelix. The created protocol can be used for regeneration without transformation, but it is also possible to implement specific steps in it that enable transformation using A. tumefaciens.

Kľúčové slová

Řepka olejka, Brassica napus, tkáňové kultury, nepřímá organogeneze, kalus, prýty, protokol

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 25. 6. 2020

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Ing. Irena Hoštičková, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Agriculture

Master programme / odbor:
Agriculture Engineering / Agricultural Biotechnology