Studium protinádorového účinku vybraných organokovových komplexů molybdenu na lidských leukemických buňkách MOLT-4

Bc. Lucie Šacherlová

Master's thesis

Study Of Antitumor Effect Of Selected Molybdenum Organometallic Complexes In Human Leukemic Cells MOLT-4

Abstract:

Diplomová práce se zabývá stanovením cytotoxické aktivity a mechanizmu působení nových monocyklopentadienylových a monoindenylových komplexů molybdenu, které byly testovány na leukemické buněčné linii MOLT-4. Jako vysoce účinné se ukázaly komplexy se substituovaným N,N chelátovým ligandem fenantrolinem. Mechanizmus účinku vybraného komplexu Mo(InO)(Me4phen) byl studován pomocí dalších spektrálních metod, průtokové cytometrie, PCR a Western blotu s imunochemickou detekcí. U ovlivněných buněk MOLT-4 došlo ke zvýšení exprese genů TP53 a CDKN1A. Naopak exprese genů CCNB1 a MDM2 byla snížena. Působením komplexu došlo u buněk ke zvýšení fosforylovaných forem CHK1 a CHK2. Dále došlo k aktivaci tumor-supresorových proteinů p53, p21 a proteinů PUMA a BAX. Ke zvýšení došlo také u fosforylovaných forem ERK a p38. Naopak množství proliferačních proteinů MDM2, BCL-2 a PCNA bylo vlivem působením komplexu sníženo. Výsledky ukázaly, že vybraný komplex způsobuje zástavu buněčného cyklu v G1 fázi a indukuje proces vnitřní cesty apoptózy aktivací kaspázy 9.

Abstract:

Diploma thesis is about cytotoxic activity of 13 new monocyclopentadienyl and monoindenyl molybdenum complexes. Complexes were tested on the leukemic cell line MOLT-4. Complexes with substitution on N,N chelate-bonded phenantroline were determined as highly cytotoxic for the cancer cell line. The mechanism of cytotoxic effect of the high efficient complex Mo(InO)(Me4phen) was establish with spectral methods, flow cytometry, PCR and the Western blot with immunochemical detection. Due to the the effect of Mo(InO)(Me4phen), expression of genes TP53 and CDKN1A was increased. On the other hand the expression of genes CCNB1 and MDM2 was highly decreased. The level of fosforylated CHK1 and CHK2 was increased in the cells. Although the level of apoptotic proteins p53, p21, PUMA, BAX and fosforylated forms of ERK and p38 was increased. The amount of antiapoptotic proteins MDM2, BCL-2 and PCNA was decresed. The cell cycle arrest in G1 phase and the induction of intrinsic pathway of apoptosis by caspase 9 activation, was proved for MOLT-4.

Keywords

Buněčný cyklus, apoptóza, cis-platina, molybdenové komplexy, WST-1, p53

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 5. 2021

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Supervisor: prof. Ing. Jaromír Vinklárek, Dr.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Analysis of Biological Materials / Analysis of Biological Materials