Ozdravování hybridů třešní v in vitro kultuře pomocí chemoterapie

Lucie Westfálová

Bachelor's thesis

Sanitation of hybrids cherries in vitro culture using chemotherapy

Abstract:

Bakalářská práce se zabývá ozdravováním vybraných genotypů třešně ptačí (Prunus avium L.) v in vitro kultuře pomocí chemoterapie. Třešeň ptačí patří mezi ekonomicky významné ovocné druhy, které jsou stejně jako mnoho dalších kulturně pěstovaných ovocných dřevin napadány virovými chorobami, snižujícími vitalitu stromů a výnos plodů. Jednou z možností, jak efektivně eliminovat virové částice z infikovaných jedinců je aplikace chemoterapie v in vitro kultuře. Hlavním cílem práce byla eliminace viru zakrslosti slivoně (Prune dwarf virus – PDV) ze tří různých kříženců třešní, vybraných z pokusné výsadby Výzkumného a šlechtitelského ústavu ovocnářského v Holovousích. V rostlinném materiálu byl testováním metodou ELISA detekován samostatný virus PDV, bez dalších směsných virových infekcí.Pro experimentální část této práce byla z dormantních výhonů odebraných v únoru 2018 založena aseptická in vitro kultura, která po dostatečném namnožení rostlinného materiálu sloužila k vlastní chemoterapii. K léčbě infikovaných explantátů bylo použito nukleosidové antivirotikum ribavirin používané v humánní medicíně k léčbě respiračních onemocnění. Koncentrace antivirotika byla stanovena na 40 mg.l-1 a 80 mg.l-1 a časový interval léčby 30 dní. Po chemoterapeutické léčbě byly explantáty subkultivovány na modifikovaném kultivačním médiu typu MS se 4 mg.l-1 BAP, kde po dobu dalších 30 dní probíhala regenerační fáze. V tomto experimentu se podařilo eliminovat PDV při koncentraci 40 mg.l-1 z většiny rostlin. Při koncentraci antivirotika 80 mg.l-1 se podařilo virové částice z rostlinného materiálu taktéž odstranit, ale citlivost rostlin na léčbu byla natolik vysoká, že není zcela vhodné ji aplikovat bez předchozích testů na fytotoxicitu jednotlivých genotypů.

Abstract:

The bachelor thesis aims at the sanitation of selected genotypes of sweet cherry (Prunus avium L.) in in vitro culture using chemotherapy.The sweet cherry is one of the economically important fruit species that. Similarly to many other cultivated fruit trees, it can be infested with viral diseases that reduce tree vitality and fruit yield. One way to effectively eliminate virus particles from infected individuals is to apply chemotherapy into in vitro culture.The main goal of this work was to eliminate the Prune dwarf virus (PDV) from three different hybrids of cherries, selected from the experimental planting of the Research and Breeding Institute of Fruit Growing Holovousy. A single PDV virus was detected in the plant material by ELISA testing. Materials were free from other viral infections.For the experimental part of this work, aseptic in vitro culture was established from dormant shoots taken in February 2018, which, after sufficient propagation of plant material, was used for its own chemotherapy. The nucleoside antiviral ribavirin (used in human medicine to treat respiratory diseases) has been used to treat infected explants. The antiviral concentration was 40 mg.l-¹ and 80 mg.l-¹ and the treatment interval was 30 days. After chemotherapeutic treatment, the explants were subcultured on modified MS-type culture medium with 4 mg.l-¹ BAP, where the regeneration phase took place for another 30 days.In this experiment, PDV at a concentration of ribavirin 40 mg.l-¹ was eliminated from most plants. Concerning ribavirin concentration of 80 mg.l-¹, virus particles were also removed from the plant material, but the sensitivity of the plants to the treatment was so high that it is not entirely appropriate to apply it without prior tests for phytotoxicity for individual genotypes.

Keywords

třešeň, meristémy, ozdravování, virus, chemoterapie

Keywords

cherry, meristems, sanitations, virus, chemotherapy

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 11. 7. 2020

Thesis defence

• Supervisor: doc. Ing. Josef Sus, CSc.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Bachelor programme / field:
Horticulture / Horticulture