Možnosti detekce časných forem sepse u novorozenců pomocí průtokové cytometrie

Karolína WOJEWODOVÁ

Master's thesis

Flow cytometry detection of early forms of neonatal sepsis

Abstract:

Novorozenecká sepse je celosvětově nejčastější příčinou úmrtí u novorozenců, zvláště v rozvojových zemích. Včasná diagnostika a rychle započatá léčba je klíčovým faktorem ke snížení úmrtnosti. V klinické praxi se jako zlatý standard v diagnostice novorozenecké sepse využívá hemokultura. Nevýhodou této metody je, že po antibiotické profylaxi matek je bakteriální růst nízký, zvláště v hemokultuře. Standardní biomarkery sepse jako celkový počet leukocytů, celkový počet neutrofilů, c-reaktivní protein a prokalcitonin mají u novorozenecké sepse dobrou negativní prediktivní hodnotu, ale jejich pozitivní prediktivní hodnota je limitována. C-reaktivní protein je běžně používaným markerem pro detekci bakteriální sepse u dětí a novorozenců, není však vhodný jako marker sepse v raném stádiu a postrádá specifitu. Lepším markerem sepse u dětí je prokalcitonin, bohužel jej nelze použít u novorozenců v prvních dnech života, kvůli jeho fyziologicky zvýšené hodnotě po porodu. Právě z těchto důvodů jsou hledány nové markery, které by disponovaly vysokou senzitivitou a specifitou a zároveň umožnovaly diagnostiku jak časné, tak pozdní novorozenecké sepse. CD64, známý jako Fc-gama receptor je vysoce afinitní imunoglobulin, který se jeví jako slibný marker novorozenecké sepse, jelikož jeho exprese narůstá již hodinu od počátku infekce. Předkládaná diplomová práce se zaměřuje na detekci časných forem sepse u novorozenců. V rámci praktické části bylo metodou průtokové cytometrie analyzováno 217 vzorků periferní krve novorozenců s cílem potvrdit asociaci přítomnosti infekce se zvýšenou expresí CD64.

Abstract:

Neonatal sepsis is one of the most common causes of mortality of neonates all over the world, particularly in developing countries. Prompt diagnosis and treatment of neonatal sepsis are crucial to prevent severe mortality. Hemoculture is used as golden standard in clinical practice. The biggest disadvantage of this method is that bacterial growth is low after antibiotical profylaxion of mothers. Standard biomarkers of inflammation, such as the total leukocyte count, neutrophil count, and acute phase reactant levels C-reactive protein, procalcitonin, have reasonable negative predictive value for infection, but their positive predictive value is limited. C-raective protein is normally used marker of neonatal and child sepsis, nevertheless is not suitable marker of early onset sepsis because of its low and specifity during early stage of infection. Better marker of bacterial sepsi sis procalcitonin, unfortunately is useless during the first days of life, because of its fyziologicaly high levels after birth. Therefore new markers are seeked. Ideal marker should have high sensitivity and specifity and also enable diagnosis of both early and late onset sepsis. As promising marker of neonatal sepsis seems nCD64, also known as FC-gama receptor, because its expression increasis already after one hour after onset of infection. Presented thesis is focused on detection of early forms of neonatal sepsis. In experimental part of this thesis was analyzed 217 periferial blood samples from neonates to prove association of CD64 increasing expression during bacterial infection.

Keywords

novorozenecká sepse, časná sepse, pozdní sepse, průtoková cytometrie, CD64

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 11. 5. 2018

Thesis defence

• Date of defence: 8. 6. 2018
• Supervisor: RNDr. Martin Novák, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Experimental Biology