Využití laseru 405 nm pro fluorescenční detekci v kapilární elektroforéze

Bc. Tomáš Škrhák

Bakalářská práce

Application of 405 nm laser for fluorescence detection in capillary electrophoresis

Anotace:

Kapilární elektroforéza s laserem indukovanou fluorescenční detekcí (CE LIF) byla použita k měření zeleně fluoreskujícího proteinu (GFP) a fuzního proteinu AHP5-GFP. Jako budící zdroj fluorescence byla použita laserová dioda emitující světlo při vlnové délce 405 nm (LD 405 nm). K nastavení citlivosti metody CE LIF bylo provedeno měření obsahu riboflavinu v B komplexu a stanovení limitu detekce (LOD) pro riboflavin. Měřením GFP bylo dosaženo reprodukovatelnosti. Z elektroforegramů AHP5-GFP vyplývá nízká reprodukovatelnost elektroforézy.

Abstract:

Capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection (CE LIF) was used to measure green fluorescent protein (GFP) and fused protein AHP5-GFP. As a source of excitation fluorescence was used a laser diode which emits light. The wave lenght of the light was 405 nm (LD 405 nm). For the adjustment of sensitivity of the method CE LIF, a measurement of the amount of riboflavin in B-complex and determination of detection limit (LOD) for riboflavin were carried out. By measurements of GFP the reproductibility was proved. The low reproductibility of electrophoresis results from electroforegrams of AHP5 – GFP.

Klíčová slova

CE LIF, kapílární elektroforéza s laserem indukovanou fluorescenční detekcí, Capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection, GFP, freen fluorescent protein, zeleně fluoreskující protein, AHP5-GFP, riboflavin, LD 405 nm

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 23. 5. 2008

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 26. 6. 2008
• Vedoucí: prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Chemie / Chemie