Možnosti diagnostiky Clostridium difficile a jeho toxinu v Nemocnici Písek, a.s.

Jana HRDLIČKOVÁ

Bachelor's thesis

Possible Diagnosis for Clostridium Difficile and Its Toxins in Písek Hospital, a.s.

Abstract:

V současné době jsou závažným problémem všech nemocnic nozokomiální infekce, tedy infekce spojené se zdravotní péčí. Mezi tyto infekce patří i střevní infekce vyvolané Clostridium difficile. Clostridium difficile je pohyblivá anaerobní grampozitivní tyčka se schopností tvořit spory. Vyskytuje se ve střevě asi 5% zdravých dospělých. Toxigenní kmeny Clostridium difficile produkují dva termolabilní proteinové toxiny, enterotoxin (toxin A) a cytotoxin (toxin B). Svými toxiny je schopno vyvolat střevní infekční onemocnění různé závažnosti, které může probíhat jako banální průjmové onemocnění, ale také jako život ohrožující stav. V literatuře se nemoc označuje jako Clostridium difficile infection (CDI) (Beneš et al., 2014a). Onemocnění patří mezi infekce spojené se zdravotní péčí a často vzniká v důsledku předchozí léčby antibiotiky. V České republice je v posledních letech patrný trend nárůstu počtu hlášených případů CDI. V roce 2008 bylo hlášeno 303 případů, v roce 2014 už to bylo 4 097 případů (Pokorná, 2015). Cílem práce je posoudit, jestli metoda či metody používané k laboratorní diagnostice CDI v Nemocnici Písek, a.s. jsou dostatečné nebo by se měla zavést další metoda. Laboratorní postup jsem porovnala s doporučenými postupy. V mé práci kvalitativní, imunochromatografickou metodou prokazuji přítomnost klostridiové glutamátdehydrogenázy a přítomnost toxinu A a B. Výsledky jsem využila ke statistickému zpracování a stanovila si hypotézy. Získaná data jsem spočetla pomocí Chí kvadrát testu, abych zjistila, jaká byla dosažena hladina významnosti. Předpokládám, že se zvýšil záchyt Clostridium difficile a jeho toxinů v Nemocnici Písek, a.s. v roce 2014 oproti roku 2013. Domnívám se, že pacienti nad nebo rovno 65 let jsou vnímavější k CDI než pacienti pod 65 let (Beneš et al., 2014b, s. 58). Dále mě zajímalo zastoupení pohlaví v mém souboru v roce 2013 a 2014 a pozitivní výsledky mužů a žen. Metoda používaná k diagnostice CDI v Nemocnici Písek, a.s. je dostatečná. V roce 2013 bylo celkem vyšetřeno 240 vzorků, z toho 209 negativních, což představuje 87,1 %, 31 vzorků bylo pozitivních, což je 12,9 %. Celkový počet mužů byl 132(55,0 %), počet žen byl 108 (45 %). V roce 2014 bylo vyšetřeno celkem 195 vzorků, z toho 169 negativních, což je 86,7 %, 26 pozitivních, tedy 13,3 %. V roce 2014 bylo vyšetřeno celkem 195 vzorků, z toho od pacientů nad 65 let bylo 122 vzorků (62,6 %), vzorků od pacientů pod 65 let bylo 73 (37,4 %). V roce 2013 bylo celkem od mužů vyšetřeno 132 vzorků a z toho bylo pozitivních 19, což představuje 14,4 %. Vzorků od žen bylo celkem 108 a z toho bylo pozitivních 12, což je 11,1 %. V roce 2014 bylo celkem od mužů vyšetřeno 75 (38,5 %) vzorků a z toho bylo pozitivních 12, tedy 16,0 %. Vzorků od žen bylo celkem odebráno 120 (61,5 %), z toho bylo pozitivních 14, což představuje 11,7 %. Záchyt Clostridium difficile ve vzorcích stolic byl v roce 2014 oproti roku 2013 srovnatelný. V mém souboru nebyli pacienti nad 65 let vnímavější k infekci oproti pacientům mladším. V těchto výsledcích se rozcházím s literaturou, která udává, že incidence a závažnost nemoci podstatně narůstá od věku nad nebo rovno 65 let. Rovněž se domnívám s přihlédnutím k mým výsledkům, že pohlaví nemá na vnímání k CDI výraznější vliv. Pro další výzkum bych doporučila větší soubor pacientů nebo delší časový úsek sledování.

Abstract:

At present, nosocomial infections, i.e. infections connected with the health care, are a serious issue in all hospitals. These infections also include intestinal infections caused by Clostridium difficile. Clostridium difficile is a movable, anaerobic gram-positive rod, which is able to form spores. It may be found in the intestines of about 5 % of healthy adults. Toxigenic strains of Clostridium difficile generate two thermolabile protein toxins, enterotoxin (toxin A) and cytotoxin (toxin B). With these toxins, it may cause intestinal infectious disease of various severity, which may occur as trivial diarrhoea or as a life-threatening condition. In literature, the disease is referred to as Clostridium difficile infection (CDI) (Beneš et al., 2014a). The disease belongs to infections connected with health care and it often occurs as a result of previous treatment with antibiotics. In recent years, the number of CDI cases reported in the Czech Republic has apparently increased. 303 cases were reported in 2008 compared to 4 097 cases in 2014 (Pokorná, 2015). The aim of the thesis is to consider whether the method(s) applied for CDI diagnostics in laboratory in Nemocnice Písek, a.s. are sufficient or whether another method should be implemented. Laboratory procedure was compared with recommended procedures. Using qualitative, immunochromatographic method, the presence of clostridium glutamate dehydrogenase as well as the presence of toxins A and B were demonstrated. The results were utilized for statistical purposes and determination of hypotheses. Obtained data were calculated by means of Chi quadrate test in order to define the achieved level of severity. My assumption is that the recovery of Clostridium difficile and its toxins increased in Nemocnice Písek, a.s. in 2014 compared to 2013. I presume that patients over 65 years of age are more sensitive to CDI than patients up to 65 years of age (Beneš et al., 2014b, p. 58). Representation of genders in my setting in 2013 and in 2014 was also focused on as well as positive results of men and women. Method applied to diagnose CDI in Písek hospital is sufficient. In total, 240 samples were examined in 2013, out of which 209 were negative, i.e. 87.1 %, and 31 samples were positive (12.9 %). Total number of men was 132 (55.0 %), number of women was 108 (45 %). In 2014, 195 samples were examined in total, out of which 169 samples were negative, i.e. 86.7 %, 26 samples were positive, i.e. 13.3 %. In 2014, 195 samples were examined in total, out of which 122 samples were taken from patients over 65 years old (62.6 %) and 73 samples from patients under 65 years old (37.4 %). In 2013, 132 samples were taken from men and examined, out of which 19 were positive, i.e. 14.4 %. 108 samples were taken from women, out of which 12 were positive, i.e. 11.1 %. In 2014, 75 samples taken from men were examined (38.5 %), out of which 12 samples were positive, i.e. 16 %. In total, 120 samples were taken from women (61.5 %), out of which 14 samples were positive, which represents 11.7 %. Recovery of Clostridium difficile fecal samples in 2014 is similar to 2013. In my setting, patients over 65 were not more sensitive to the infection compared to younger patients. These results differ from literature stating that the incidence and severity of the disease is increasing significantly after 65 years of age. With regard to the results, I also assume that gender influences the sensitivity to CDI only slightly. For further study, larger sample of patients or longer time span for monitoring would be needed.

Keywords

Clostridium difficile, četnost výskytu CDI, postantibiotické průjmy, produkce toxinů, imunochromatografická metoda

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2015

Accessible from:: 5. 5. 2015

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Věra Kůrková

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant