Příprava polyklonálních protilátek proti progesteronu a jejich využití v imunoafinitní chromatografii

Ondřej JUŘENA

Bakalářská práce

Preparation of polyclonal antibodies against steroids hormones and their use in the immunoaffinity chromatography

Anotace:

Protilátky neboli imunoglobuliny jsou jednou z nejdůležitějších součástí imunity člověka. Jde o látky bílkovinné povahy, které specificky interagují s antigenem. Tohoto faktu se využívá v řadě imunochemických metod, které mají široké uplatnění jak v medicínské praxi, tak v oblasti výzkumu. Jednou z nejpoužívanějších imunochemických metod je imunoafinitní chromatografie, která nachází své využití především při velké řadě purifikačních procesů. Cílem této bakalářské práce byla příprava polyklonálních protilátek namířených proti progesteronu. Z krevního séra imunizovaných králíků byly po několika úpravách získány relativně čisté protilátky. Vlastnosti těchto protilátek,především pak jejich křížová reaktivita, byly testovány pomocí přímé enzymové imunoanalýzy. Protilátky byly dále navázány na afinitní gel a v budoucnosti mohou být využity v imunoafinitní chromatografii při čištění rostlinného materiálu za účelem stanovení steroidních hormonů.

Abstract:

Antibodies or immunoglobulins are one of the most important parts of human immunity. These protein substances interact specifically with the antigen. This fact is utilized in a number of immunochemical methods that have wide application in medical practice and research. One of the most used immunochemical methods, immunoaffinity chromatography, which finds its use in especially when a large number of purification processes. The aim of this work was to prepare polyclonal antobodies against progesterone. The blood serum of the immunized rabbits were obtained after a few adjustments to the relatively pure antibodies. The properties of these antibodies, especially their cross-reactivity, were tested by direct enzyme immunoassay. Antibodies were than bound to the affinity gel and will be used for determination of steroid hormones in plant material by immunoaffinity purification.

Klíčová slova

Enzymová imunoanalýza (ELISA), imunoafinitní chromatografie, progesteron, protilátky

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 29. 4. 2013

Zveřejnit od: 29. 4. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 28. 5. 2013
• Vedoucí: Mgr. Jana Oklešťková, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie