Determination of the bioactive compounds using modern LC-MS methods

Mgr. Ivan PETŘÍK

Doctoral thesis

Determination of bioactive compounds by modern LC/MS methods

Abstract:

V posledním desetiletí se fyziologie rostlin vyvinula v multidisciplinární obor zahrnující proteomiku, transkriptomiku, genetiku, fenomiku, a co je důležité, i rostlinnou hormonomiku. Výzkumné metody v dnešní době kladou důraz na miniaturizaci a vysokou propustnost, protože se zaměřují na stále menší části rostlinného organismu. Cílem této práce bylo vyvinout nové miniaturizované a vysoce propustné metody pro stanovení bioaktivních rostlinných hormonů, jejich metabolitů a prekurzorů. S využitím nejmodernějších přístupů kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní detekcí byla ve spolupráci s dalšími obory rostlinné fyziologie objasněna role rostlinných hormonů při růstu rostlin a obraně proti stresovým podmínkám. Nově vyvinutý přístup přípravy vzorků založený na disperzní extrakci na pevné fázi a analytický přístup využívající superkritickou fluidní chromatografii v kombinaci s tandemovou hmotnostní detekcí rozšířily stávající portfolio metod rostlinné hormonomiky.

Abstract:

In the past decade, plant physiology has evolved into a multidisciplinary field encompassing proteomics, transcriptomics, genetics, phenomics, and notably, plant hormonomics. Research methods nowadays emphasize miniaturization and high throughput, as the focus is on increasingly smaller components of the plant organism. The aim of this thesis was to develop new miniaturized and high-throughput methods for the determination of bioactive plant hormones, their metabolites, and precursors. Utilizing state-of-the-art liquid chromatography with tandem mass detection, in collaboration with other branches of plant physiology, the role of plant hormones during plant growth and defence against stress conditions was elucidated. The newly developed sample preparation approach based on dispersive solid-phase extraction, and analytical approach employing supercritical fluid chromatography combined with tandem mass detection, has expanded the existing portfolio of plant hormonomics methods.

Keywords

rostlinný hormon, kvantifikace, chromatografie, UHPLC, SFC, hmotnostní spektrometrie, MS/MS, návrh experimentu

Jazyk práce: English

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 4. 2024

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: prof. Mgr. Ondřej Novák, Ph.D., prof. Mgr. Ondřej Novák, Ph.D.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Doctoral programme / odbor:
Biology / Experimental Biology