Studium buněčného oxidativního stresu pomocí elektrochemického skenovacího mikroskopu

Bc. Pavla Fialová

Diplomová práce

Study of cellular oxidative stress using an electrochemical scanning microscope

Anotace:

Tato diplomová práce se zabývá skenovací elektrochemickou mikroskopií (SECM). V první části práce se nachází krátký úvod do elektrochemie. Další část práce se zabývá charakteristikou SECM, popisem skenovacího elektrochemického mikroskopu a základními principy měření na UME. Základním měřicím režimem SECM je režim zpětné vazby, který zahrnuje negativní zpětnou vazbu a pozitivní zpětnou vazbu, dalším měřicím režimem generující-sběrný režim. Pozornost je věnována také oxidativnímu buněčnému stresu, standardním metodám používaným pro jeho stanovení a jsou zde popsány studie, které se měřením oxidativního buněčného stresu pomocí SECM zabývaly. Praktická část práce je zaměřena na měření oxidačního stresu pomocí SECM. Nejdříve byla měřena destička a průřez makroelektrody, na kterých se nacházely části z vodivého i nevodivého materiálu. Díky tomu mohlo být optimalizováno vhodné nastavení pro měření buněk. Následně byly pomocí SECM měřeny kožní buňky HaCaT. U těchto buněk bylo zkoumáno, jak se na nich při měření projevilo přidání H2O2, který u nich vyvolal oxidativní buněčný stres.

Abstract:

This thesis deals with scanning electrochemical microscopy (SECM). In the first part of the thesis there is a short introduction to electrochemistry. Another part deals with the characteristics of the SECM, the description of the scanning electrochemical microscope and the basic principles of measurement on the ultramicroelectrode. The basic SECM measurement mode is the feedback mode, which includes negative feedback and positive feedback, another measurement mode generating-collection mode. Attention is also paid to oxidative cellular stress, standard methods used for its determination, and there are described studies that have looked at the measurement of oxidative cellular stress using SECM. The practical part of the thesis is focused on measuring oxidative stress using SECM. First the plate and the cross-section of the macroelectrode were measured, on which were parts of conductive and non-conductive material. This allowed optimizing the appropriate settings for cell measurements. Subsequently, HaCaT skin cells were measured using SECM. These cells were studied to see how the addition of H2O2 caused oxidative cellular stress during the measurements.

Klíčová slova

buňky, HaCaT, skenovací elektrochemická mikroskopie, SECM, mikroelektroda, UME, oxidativní stres, ROS

Keywords

scanning electrochemical microscopy, SECM, microelectrode, UME, oxidative stress, ROS, cells, HaCaT

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 22. 4. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. David Hynek, Ph.D.

Mendelova univerzita v Brně

Agronomická fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie a technologie potravin / Jakost a zdravotní nezávadnost potravin