Identifikace proliferujících buněk ve směsných populacích

Bc. Deborah Beckerová

Bakalářská práce

Identification of proliferating cells in mixed populations

Anotace:

Tato bakalářská práce se věnuje možnostem sledování proliferace kardiomyogenních progenitorů in vitro. Teoretická část shrnuje metody, které lze ke sledování využít, jejich výhody a limitace. Praktická část je věnována testování a optimalizaci vybraných metod pro sledování proliferace kardiomyogenních progenitorů ve směsné populaci. Využito bylo značení proliferujících buněk pomocí EdU nebo protilátka proti fosforylovanému histonu H3, v kombinaci s označením těžkého řetězce myosinu pomocí protilátky MF20 nebo buněčné linie s reporterem Nkx-eGFP. Ukázalo se, že EdU je pro buňky toxický při dlouhodobé kultivaci. Proto výsledky získané značením EdU a MF20 pravděpodobně neodpovídají realitě a budou potřeba další optimalizace metody.

Abstract:

The focus of this thesis is detection of proliferating cardiomyocytes during their development in vitro. In the theoretical part, various methods used to detect proliferating cells are described as well as their advantages and limitations. In the practical part of this thesis, tests and optimisation of chosen methods for detection of proliferating cardiomyogenic progenitors are described. Proliferating cells were detected either by labelling incorporated EdU or phosphorylated histon H3. Cardiomyocytes were detected by anti-myosin heavy chain antibody MF20 or using cell line with Nkx-eGFP reporter. EdU proved to be toxic for cells in long-term cultivation. Therefore, results obtained are likely misrepresentative and further optimisations of this method will be needed.

Klíčová slova

proliferace, EdU, kmenové buňky, kardiomyogeneze, proliferation, stem cells, cardiomyogenesis

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 25. 6. 2019
• Vedoucí: Mgr. Jiří Pacherník, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie