Izolace a charakterizace nových lektinů z makromycet

Bc. Alexandra Mrázová

Diplomová práce

Isolation and characterization of new lectins from macromycetes

Anotace:

Lektiny jsou proteiny schopné reverzibilně a specificky vázat sacharidy. Tato schopnost je klíčová pro různé funkce a aplikace lektinů, zejména v oblastech biotechnologie a biomedicíny. Cílem této práce byla izolace a charakterizace nového lektinu z houby Chlorophyllum rhacodes (bedla červenající), který byl nalezen v předchozí studii. Chlorophyllum rhacodes lektin (CRL) byl izolován pomocí afinitní chromatografie s N-acetyl-β-D-glukosaminovým sorbentem. Po následné dialýze a lyofilizaci byl CRL charakterizován pomocí různorodých metod, jako je například hemaglutinační test, inhibice hemaglutinace, glycan array, spektroskopie cirkulárního dichroismu či diferenční skenovací fluorimetrie. Byly také úspěšně připraveny krystaly CRL, z kterých byla naměřena difrakční data. Pomocí hmotnostní spektrometrie byla získána téměř celá sekvence CRL.

Abstract:

Lectins are proteins with the ability to specificly and reversibly bind saccharides. This ability is crucial for various functions and applications of lectins, especially in the fields of biotechnology and biomedicine. The aim of this study was the isolation and characterization of a new lectin from the mushroom Chlorophyllum rhacodes (shaggy parasol), which was found in a previous study. Chlorophyllum rhacodes lectin (CRL) was isolated using affinity chromatography with N-acetyl-β-D-glucosamine as the sorbent. After subsequent dialysis and lyophilization, CRL was characterized using various methods, such as hemagglutination assay, hemagglutination inhibition assay, glycan array, circular dichroism spectroscopy, and differential scanning fluorimetry. Additionally, crystals of CRL were successfully prepared, from which diffraction data were obtained. Almost the entire sequence of CRL was obtained using mass spectrometry.

Klíčová slova

lektiny,, houby,, Chlorophyllum, rhacodes,, bedla, červenající

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2024

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 20. 6. 2024
• Vedoucí: prof. RNDr. Michaela Wimmerová, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Gita Paulíková, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie