Využití koprologické metody Mini-FLOTAC pro diagnostiku gastrointestinálních helmintóz u rodu Rattus

Bc. Veronika Valentová

Master's thesis

Mini-FLOTAC coprological method for diagnostic of gastrointestinal helminthosis in Rattus spp.

Abstract:

Tato práce byla zaměřena na zhodnocení vhodnosti koprologické metody Mini-FLOTAC k diagnostice gastrointestinálních helmintóz u hlodavců rodu Rattus, vyskytujících se na území České republiky. Cílem práce bylo otestovat diagnostické parametry této metody s ohledem na její schopnost poskytnout relevantní výsledky pro stanovení intenzity infekce různými druhy gastrointestinálních helmintů a detekovat skutečné druhové složení helmintů přítomných v gastrointestinálním traktu vyšetřených hlodavců. Praktická část diplomové práce byla rozdělena do dvou částí. První část experimentu se zabývala standardizací zvolené metody, přičemž byla ověřována její citlivost a přesnost na uměle inokulovaných vzorcích vajíčky tasemnice Hymenolepis diminuta. Získané výsledky byly statisticky vyhodnoceny za použití ANOVA analýzy a Scheffeho testu. Výsledky prokázaly nízkou přesnost metody u všech testovaných hladin EPG a nedostatečnou citlivost při definované hodnotě 10 EPG. V druhé části experimentu bylo provedeno testování metody Mini-FLOTAC na přirozeně infikovaných vzorcích získaných z volně žijících hlodavců rodu Rattus. V rámci tohoto experimentu bylo zanalyzováno celkem 98 vzorků, ve kterých byly identifikovány propagační útvary druhů: Hymenolepis spp., Syphacia spp., Trichuris muris, Aspiculuris tetraptera a Heterakis spumosa. Ke statistickému vyhodnocení této části experimentu byla použita regresní a korelační analýza, srovnávající získané hodnoty EPG s výsledky přímé pitvy gastrointestinálních traktů vyšetřovaných hlodavců. Metoda Mini-FLOTAC správně detekovala druhové spektrum helmintů, vyskytujících se v gastrointestinálních traktech hlodavců, avšak přesnost získaných výsledků byla variabilní pro jednotlivé druhy helmintů. Toto zjištění naznačuje, že metoda není univerzálně spolehlivá pro kvantifikaci zatížení gastrointestinálními helminty u hlodavců rodu Rattus. Nejvýznamnějšími limitacemi tohoto výzkumu byl nízký počet vzorků, nedostatečné navážky k naplnění obou vyšetřovacích komor apararátu Mini-FLOTAC a možné narušení propagačních útvarů způsobem konzervace vzorků. Výsledky této práce zdůraznily nutnost dalšího metodického zdokonalení pro zlepšení výsledků získaných použitím metody Mini-FLOTAC, pro spolehlivou neinvazivní diagnostiku gastrointestinálních helmintóz u hlodavců.

Abstract:

This thesis was focused on the evaluation of the suitability of the Mini-FLOTAC coprological method for the diagnosis of gastrointestinal helminthosis in rodents of the genus Rattus occurring in the Czech Republic. The aim of this work was to test the diagnostic parameters of this method with regards to its ability to provide relevant results for determining the intensity of infection by different species of gastrointestinal helminths and to detect the actual species composition of helminths present in the gastrointestinal tracts of examined rodents. The practical experiment of this thesis was split into two parts. The first part of the experiment dealt with the standardization of the chosen method, where its sensitivity and accuracy were verified on samples artificially inoculated with the eggs of the tapeworm Hymenolepis diminuta. The obtained results were statistically evaluated using ANOVA analysis and Scheffe’s test. The results showed low accuracy of the method at all tested EPG levels and insufficient sensitivity at the defined value of 10 EPG. In the second part of the experiment, the Mini-FLOTAC was tested on naturally infected samples obtained from wild rodents of the Rattus genus. In this experiment, a total of 98 samples were analysed, in which eggs of Hymenolepis spp., Syphacia spp., Trichuris muris, Aspiculuris tetraptera and Heterakis spumosa were identified. Regression and correlation analysis was used to statistically evaluate this part of the experiment, comparing the obtained EPG values with the results of direct dissection of the gastrointestinal tracts of the rodents examined. The Mini-FLOTAC method correctly detected the helminth species spectrum present in the gastrointestinal tracts of the rodents, but the accuracy of the results obtained was variable for the different helminth species. This finding suggests that the method is not universally reliable for quantifying gastrointestinal helminth burden in rodents of the genus Rattus. The most significant limitations of this research were the low number of samples, insufficient amounts of material to fill both flotation chambers of the Mini-FLOTAC apparatus, and possible damage to the parasite eggs by the method of sample preservation. The results of this thesis highlighted the need for further methodological refinement to improve the results obtained using the Mini-FLOTAC method, in order to get a reliable, non-invasive diagnosis of gastrointestinal helminthosis in rodents.

Keywords

Nematoda, in-vivo diagnostika, koprologické vyšetření, Cestoda, EPG, diverzita a intenzita infekce

Keywords

Cestoda, Nematoda, in-vivo diagnostics, coprological diagnostics, EPG, diversity and intensity of infection

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 18. 4. 2024

Thesis defence

• Date of defence: 21. 5. 2024
• Supervisor: Ing. Zuzana Čadková, Ph.D. DiS.
• Reader: Svobodová Vlasta, externi

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme:
Companion Animal Management