Vliv artemisininu na střevní mikrobiom

Bc. Lenka Poskerová

Master's thesis

Impact of artemisinin on intestinal microbiome

Abstract:

Jednou z celosvětově nejzávažnějších infekčních onemocnění je malárie. Je přenášena v tropických oblastech, převážně v Subsaharské Africe. Každoročně způsobuje tisíce případů úmrtí, především u dětí do 5 let věku, u kterých je průběh onemocnění nejzávažnější. Probiotické organismy mohou pozitivně ovlivňovat průběh tohoto onemocnění. Adherenční schopnost těchto organismů na buňky střevního epitelu je jedním ze základních podmínek úspěšné kolonizace a možnosti modulace imunitního systému. Artemisinin je v dnešní době jednou z nejpoužívanějších látek jako účinné antimalarikum.Cílem naší práce bylo otestovat a zhodnotit vliv artemisininu o různých koncentracích na adherenční schopnost dvou vybraných kmenů laktobacilů na buněčný model kolorektálního adenokarcinomu Caco-2 a HT29. Nejprve byly buněčné linie kolorektálního karcinomu kultivovány v DMEM médiu po dobu 7 dní, při 37 °C v 5 % CO2 atmosféře. Poté byl založen buněčný model v 24 jamkové destičce přidáním Caco-2 a HT29 do buněčné suspenze. Destička se následně kultivovala po dobu 14 dní. K buněčnému modelu byl přidán artemisinin s vybranými kmeny laktobacilů a po dobu 2 hodin při 37 °C kultivována v 5 % CO2 atmosféře. Po této inkubaci byly buňky sklizeny a následně rozpuštěny ve fosfátovém pufru. Vytvořená suspenze byla naočkována na Petriho misky, které byly přelity ROGOSA agarem. Petriho misky se nechaly inkubovat 72 hodin s následným spočítáním KTJ.Test adherence proběhl na kmenu Lactobacillus brevis a Lactobacillus gaserri. Výsledky ukázaly, že adherence u L. gaserri se pohybovala od 0,3 % do 3,5 %. U L. brevis došlo dokonce ke zhoršení aherenční schopnosti a to v rozmezí od 0,1 % do 3,4 %.Z výsledků je zřejmé, že artemisinin negativně ovlivňuje adhezi testovaných laktobacilů.

Abstract:

One of the world's most serious infectious diseases is malaria. It is transmitted in tropical areas, mainly in Sub-Saharan Africa. It causes thousands of deaths every year, especially in children under the age of 5, where the disease is most severe. Probiotic organisms can positively influence the course of this disease. The adherence ability of these organisms to intestinal epithelial cells is one of the basic conditions for successful colonization and the possibility of modulating the immune system. Nowadays, Artemisinin is one of the most widely used substances as an effective anti-malarial agent.The aim of our study was to test and evaluate the effect of artemisinin at various concentrations on the adherence ability of two selected lactobacilli strains on the cell model of colorectal adenocarcinoma Caco-2 and HT29. First, the colorectal cancer cell lines were cultured in DMEM medium for 7 days, at 37 °C in a 5 % CO2 atmosphere. The cell model was then established in a 24 well plate by adding Caco-2 and HT29 to the cell suspension. The plate was subsequently cultured after 14 days. To the cell model, artemisinin with selected lactobacilli strains was added and cultured in a 5 % CO 2 atmosphere for 2 hours at 37 °C. After this incubation, the cells were harvested by means of a solution and subsequently dissolved in phosphate buffer. The resulting suspension was seeded on Petri dishes and poured over ROGOSA agar. Petri dishes were allowed to incubate for 72 hours followed by counting CT.The adherence test was performed on the strain Lactobacillus brevis and Lactobacillus gaserri.The results showed that adherence in L. gaserri ranged from 0,3 % to 3,5 %. L. brevis even had a deterioration in its ability to play, ranging from 0.1% to 3,4 %.The results show that artemisinin affect the adhesion of the tested lactobacilli.

Keywords

artemisinin, adhese, probiotika, střevní mikrobiota, in vitro buněčný model

Keywords

artemisinin, adhesion, probiotics, intestinal microbiota, in vitro cell model

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 12. 4. 2019

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Ivo Doskočil, Ph.D.
• Reader: Radko Pechar, externi

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme / field:
Nutrition and Foodstuffs / Nutrition and Foodstuffs