Ověření vlastností HPLC metody indikujících stabilitu rivaroxabanu pro účely farmaceutické analýzy

Bc. Miroslava HLISTOVÁ

Master's thesis

Validation of stability indicating properties of an HPLC method for rivaroxaban for the purpose of pharmaceutical analysis

Anotácia:

Hlavním cílem této diplomové práce bylo ověření, zda je metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro stanovení rivaroxabanu schopná indikovat jeho stabilitu. Podle standardního operačního postupu byly nalezeny vhodné stresové podmínky pro studium stability rivaroxabanu. Stresované vzorky byly následně analyzovány třemi HPLC-UV/DAD metodami: 1) pro zjištění obsahu známých nečistot a degradačních produktů a hodnocení čistoty píku, 2) pro zjištění obsahu hlavní látky a 3) pro sledování možné racemizace rivaroxabanu. Byla prokázána schopnost HPLC metody pro obsah nečistot indikovat stabilitu, neboť nebyl nalezen žádný důkaz pro koeluci píku hlavní látky s některou nečistotou, všechny píky rivaroxabanu byly zhodnoceny jako spektrálně čisté. Zároveň byla popsána vysoká citlivost rivaroxabanu vůči bazickým podmínkám, citlivost vůči kyselým podmínkám, oxidaci peroxidem vodíku a UV záření v roztoku. Rivaroxaban byl stabilní při zahřívání v roztoku, při působení oxidu manganičitého a také při působení UV záření a tepla na léčivou látku v pevné fázi. Ověření HPLC metody bylo provedeno ve farmaceutické společnosti Teva Czech Industries s.r.o. Na závěr byl pokus o objasnění struktury degradačních produktů. Za tímto účelem byly stresované vzorky podrobeny analýze metodou ultraúčinné kapalinové chromatografie spojené s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením (UPLC-HRMS).

Abstract:

The main aim of this thesis was to validate the ability of a high performance liquid chromatography (HPLC) method for determination of rivaroxaban to indicate its stability. According to the standard operating procedure, appropriate stress conditions for stability studies of rivaroxaban were found. Stressed samples were analyzed by three HPLC-UV/DAD methods for: 1) Determination of the content of known impurities and degradation products and evaluation of the peak purity 2) Determination of the content of the main compound, and 3) Monitoring the possible racemization of rivaroxaban. No evidence for peak co-elution was observed, all peaks of rivaroxaban were considered to be pure and therefore the ability of HPLC impurity method to indicate stability was demonstrated. Rivaroxaban was very sensitive to basic conditions, sensitive to acid conditions, to oxidation by hydrogen peroxide and to irradiation in solution. Rivaroxaban was resistant to heat in solution, to the effect of manganese dioxide and to the effect of heat and UV irradiation on the drug substance in solid state. Validation of HPLC method was performed in pharmaceutical company Teva Czech Industries s.r.o. Finally, elucidation of the structure of degradation products was attempted. Stressed samples were analyzed by ultra pefrormance liquid chromatography method coupled with high resolution mass spectrometry.

Kľúčové slová

HPLC, HPLC-HRMS, stabilitu indikující metoda, stabilita léčivých látek, stresové podmínky, rivaroxaban

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 24. 4. 2015

Zverejniť od: 24. 4. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: doc. RNDr. Petr Fryčák, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY IN OLOMOUC

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Analytical Chemistry