Proteomická analýza lidských spermatických buněk u jedinců s normozoospermií

Bc. Aneta Březáčková

Diplomová práce

Proteomic analysis of human sperm cells in individuals with normozoospermia

Anotace:

Mužská neplodnost je komplexní onemocnění, které může být způsobeno celou řadou příčin. Zatímco některé příčiny jsou známé a poměrně dobře popsané, existují stavy, kdy příčina neplodnosti není známá – v takových případech se mluví o tzv. idiopatické neplodnosti. V současné době se pro posouzení mužské plodnosti využívá spermiogram. Tyto testy však neposkytují informace o molekulárních faktorech, které by mohly být zodpovědné za mužskou neplodnost. Hlavním cílem této práce bylo provedení celoproteomové analýzy lidských spermatických buněk u jedinců, kteří vykazovali normozoospermii a porovnání souboru proteinů, které byly detekovány ve vzorcích. Vzorky byly připraveny metodou FASP a následně byla provedena hmotnostně-spektrometrická analýza včetně databázového prohledání a statistického vyhodnocení. Pomocí statického testu LIMMA byly získány významné změny v hladinách proteinů mezi jednotlivými skupinami. Identifikovány byly proteiny související s mužskou neplodností, ale i ty, které s mužskou neplodností doposud spojeny nebyly. Tato pilotní proteomická analýza je základem pro vypracování celoproteomové studie zahrnující statisticky významnou skupinu vzorků pocházejících od pacientů s různými diagnózami mužské neplodnosti.

Abstract:

Male infertility is a complex disease that can be caused by a variety of factors. While some of the causes are known and relatively well described, there are conditions where the cause of infertility is unknown – in such cases, we speak of so-called idiopathic infertility. Currently, a spermiogram is used to assess male fertility. However, these tests do not provide information on the molecular factors that may be responsible for male infertility. The main goal of this work was to perform a whole-proteome analysis of human sperm cells in individuals who met the criteria of normozoospermia and compare the set of proteins that were detected in the samples. The samples were prepared by the FASP method, and then mass spectrometric analysis including database searching and statistical evaluation was performed. Significant changes in protein levels between individual groups were obtained using the LIMMA statistic test. Proteins associated with male infertility as well as those not previously associated male infertility were identified. This pilot proteomic analysis is the basis for processing a whole proteome study including a statistically significant group of samples originating from patients with different diagnosis of male infertility.

Klíčová slova

mužská neplodnost, spermiogram, seminální plazma, normozoospermie, proteomika, FASP, hmotnostní spektrometrie, male infertility, seminal plasma, normozoospermia, proteomics, mass spectrometry

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 5. 2023

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 13. 6. 2023
• Vedoucí: Mgr. Gabriela Lochmanová, Ph.D.
• Oponent: Mgr. et Mgr. Lenka Kohútová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik