Vývoj inhibitorů dehalogenáz - potenciálních antituberkulotik

Mgr. Ondřej Neuwirth

Diplomová práce

Development of dehalogenase inhibitors - potential antituberculotics

Anotace:

Mykobakteriální infekce jsou závažným problémem a spolu s infekcemi virem HIV jsou největšími zabijáky dnešního světa. Díky neustále se zvyšující resistenci na dnes používané antituberkulotika a absenci nových léků se tuberkulosa rychle šíří. Bylo zjištěno, že mykobakterie kódují hned 3 geny pro halogenalkandehalogenasy (HLDs), ale dodnes není přesně jasná jejich funkce, potenciální substráty, ani jak/zda jsou zapojeny do mechanismu přežití. Teoretická část diplomové práce je zaměřena na oxidativní vzplanutí a na produkci reaktivním forem kyslíku a dusíku a na možné obranné mechamismy bakterií. Dále je popsáno Mycobacterium tuberculosis a jeho dosud známé mechanismy resistence. Praktická část se zabývá expresí a purifikací čtyř různých HLDs (LinB ze Sphingobium japonicum UT26, DbjA z Bradyrhizobium japonicum USDA110, DmbA z Mycobacterium tuberculosis H37Rv a DatA z Agrobacterium tumefaciens C58), syntézou halogenovaných látek a jejich testování jako potenciálních substrátů vybraných enzymů.

Abstract:

Mycobacterial infection is a serious problem and together with infection by HIV belongs to the biggest killers in the world today. Due to the increasing level of resistance to currently used drugs and the absence of new antituberculotic drugs, mycobacterial infections are spreading rapidly. In recent years, it was found that mycobacteria encode three genes of haloalkane dehalodenases (HLDs), but their function and/or natural substrates still have not been discovered. The theoretical part of this Diploma Thesis is focused on immunity reactions, oxidative burst and resistance of bacteria. Mycobacterium tuberculosis and its known survival strategies are also described in this part. Practical part includes expression and purification of four selected HLDs (LinB from Sphingobium japonicum UT26, DbjA from Bradyrhizobium japonicum USDA110, DmbA from Mycobacterium tuberculosis H37Rv and DatA from Agrobacterium tumefaciens C58), synthesis of halogenated compounds and tests of HLDs for the activity with these halogenated derivates.

Klíčová slova

Mycobacterium tuberculosis, halogenalkandehalogenasa, oxidativní vzplanutí

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 21. 1. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 2. 2013
• Vedoucí: prof. RNDr. Zbyněk Prokop, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Analytická biochemie