Imobilizace beta-galaktosidasy na magnetické celulosové mikročástice

Lenka KABRDOVÁ

Bakalářská práce

Imobilizace beta-galaktosidasy na magnetické celulosové mikročástice

Immobilization of beta-galactosidase on magnetic cellulose microspheres

Anotace:

Tato práce se zabývá imobilizací beta-galaktosidasy na magnetické mikročástice modifikované celulosou. Teoretická část pojednává o beta-galaktosidase, jejím výskytu a vlastnostech (struktura, chemické reakce, substrátová specifita, inhibice, purifikace a metody stanovení aktivity). Dále se zabývá procesem imobilizace a jeho metodami (adsorpce, zachycení, enkapsulace, zesíťování, kovalentní vazba, bioafinita). Poslední kapitola teoretické části pojednává o nosičích, jejich rozdělení, typy a vlastnosti. Praktická část je soustředěna na imobilizaci beta-galaktosidasy na magnetické mikročástice modifikované celulosou. Imobilizací byly změněny vlastnosti beta-galaktosidasy. Tyto změny byly srovnány s volnou formou beta-galaktosidasy. Byla stanovena vazebná kapacita beta-galaktosidasy na nosiči. Stanovení stability volné i imobilizované formy beta-galaktosidasy bylo uskutečněno spektrofotometrickou metodou s 2-nitrophenyl beta-D-galaktopyranosidem. Bylo stanoveno pH optimum, teplotní stabilita, funkční stabilita, skladovací stabilita, Michaelisova konstanta a operační stabilita.

Abstract:

This work deals with immobilization of beta-galactosidase on magnetic microparticles modified by cellulose. The theoretical part deals with the beta-galactosidase, its occurrence and properties (structure, chemical reactions, substrate specifity, inhibition, purification and methods of determination activity). It also deals with the process of immobilization and its methods (adsorption, capture, encapsulation, cross-linking, covalent binding, bioaffinity). The last chapter of the theoretical part is focused on the supports, its distribution, types and properties. The practical part is focused on beta-galactosidase immobilization on magnetic microparticles modified by cellulose. The properties of beta-galactosidase were changed by immobilization. These changes were compared with the free form of beta-galactosidase. The weighted capacity of beta-galactosidase was determinated. Determination of the stability of free and immobilization forms of beta-galactosidase was carried out by the spectrophotometric method with 2-nitrophenyl beta-D-galactopyranoside. pH optimum, thermal stability, functional stability, storage stability, the Michaelis constant and operational stability were determinated.

Klíčová slova

beta-galaktosidasa, imobilizace, mikročástice

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 31. 7. 2012

Zveřejnit od: 31. 7. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 9. 2012
• Vedoucí: Doc. RNDr. Ludmila Zajoncová, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie