Kvantitativní změny IL- 6 ve spinálních gangliích laboratorního potkana po unilaterálním poškození sedacích nervů

Bc. Zuzana Veselková

Diplomová práce

Quantitative changes of IL-6 in the rat spinal ganglia after unilateral sciatic nerve injury

Anotace:

Neuropathic pain state can arise from peripheral nerve injury. Within cell bodies of injured primary sensory neurons in dorsal root ganglia there is induced changed gene expresion. The new molecular synthesis paterns involve altered cytokine expresion. A significant involvement of IL-6 protein in neuropathic pain induction and modulation of nerve regeneration is suggested from several lines of experimental studies. This study sought to evaluate both spatial and temporal changes of IL-6 protein levels in plasma and ipsi- and contralateral lumbal (L4-L5) dorsal root ganglia (DRG) after the lesion of peripheral nerve. Commercially available ELISA test (BioSource, CA, USA) was used for quantitative analysis of IL-6 protein. Male Wistar rats weighing (250-300 g) were divided into three groups: i/ non-operated animals (n=9) rats; ii/ the group underwent aseptic triple unilateral ligation of sciatic nerve (ScNL; n=36) with periods of survival for 1, 3, 7 and 14 days; iii/ operated group without any nerve lesion (sham operaton, n=15) with periods of survival 1,3 and 14 days. Generally in first days after ScNL and sham operation there was measured significant increas in IL-6 protein levels in both ipsilateral and contralateral lumbal DRG.. The DRG from other periods of survival displayed just mild increase of IL-6 protein levels close to the control baseline level. Levels of IL-6 protein in plasma showed the same elevation and reduction during postoperative periods as was seen in tissue samples, but in plasma the levels of IL-6 were much more lower than in tissue. The obtained data provide evidence for changes of IL-6 protein levels in plasma as well as in the DRG associated and non-assosiated with damaged nerve in rat experimental neuropathic pain model. Stimuli for bilateral increase of IL-6 protein in the DRG after unilateral nervous lesion are probably of systemic charakter.

Abstract:

Po poškození periferního nervu může dojít k rozvoji neuropatické bolesti. V tělech poškozených primárních somatosensorických neuronů ve spinálních gangliích je indukována změněná exprese genů. Pozměněná syntéza moleku- lárních faktorů se tyká také cytokinů. Výsledky studií ukazují na významnou úlohu IL-6 proteinu při rozvoji neuropatické bolesti. Cílem této diplomové práce bylo zjistit k jakým prostorovým a časovým změnám dochází v expresi IL-6 proteinu v ipsi- a kontralaterálních lumbálních (L4-L5) spinálních gangliích a plazmě po experimentálním poškození periferního nervu u laboratorního potkana. Ke kvantitativnímu zhodnocení IL-6 proteinu byl použit komerčně dostupný ELISA test (BioSource, CA, USA). Samci Wistar potkanů byly rozděleni do 3 skupin i/ neoperovaná zvířata (n=9); ii/ skupina s unilaterální ligaturou sedacího nervu (n=36) s intervaly přežití 1, 3, 7 a 14 dnů; iii/ skupina operovaná bez přístupu na nerv (n=15) s intervaly přežití 1, 3 and 14 dnů. Obecně bylo zjištěno, že se hladiny IL-6 proteinu signifikantně bilaterálně zvyšují ve spinálních gangliích v prvních dnech po zákroku u obou skupin s chirurgickým zákrokem. V pozdějších intervalech přežití se hladiny IL-6 proteinu ve spinálních gangliích vracejí na úroveň zjištěnou u neoperovaných kontrol. Změny hladin IL-6 proteinu v plazmě kopírovaly zvýšení a snížení ve tkáních spinálních ganglií. Obecně byly hladiny IL-6 proteinu v plazmě řádově nižší než ve tkáních. Naměřené data ukazují na změny IL-6 proteinu po unilaterálním poškození periferního nervu v plazmě a ve spinálních gangliích asociovaných s poškozeným nervem, ale i v těch neasociovaných. Stimuly vedoucí k bilaterálním změnám IL-6 ve spinálních gangliích po poškození nervu jsou pravděpodobně systémového charakteru.

Klíčová slova

Key words, neuropathic pain, peripheral nerve injury, interleukin 6, ELISA test Klíčová slova, neuropatická bolest, poškození periferního nervu, ELISA

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2009

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 11. 6. 2009
• Vedoucí: prof. RNDr. Petr Dubový, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Obecná biologie