Modifikace konvenčních ředidel za účelem zlepšení kvalitativních parametrů konzervovaného beraního spermatu

Jan Bejček

Bachelor's thesis

Modification of conventional diluents in order to improve the quality parameters of conserved ram sperm

Abstract:

Práce je zpracována jako literární rešerše a zabývá se souhrnem poznatků o zpracování ejakulátu a aditivních přídavků do ředidel a následným hodnocením na bázi polních testů (inseminace) či specializovaných laboratorních testů. Jeden z hlavních důvodů nízkého využití inseminace v chovu ovcí je kvůli tomu, že beraní ejakulát má nízkou kryotoleranci a tudíž buňky po rozmrazení mají nízkou fertilizační schopnost. Média pro konzervaci jsou primárně typována pro velké přežvýkavce. Proces zpracování ejakulátu má několik fází. Jednou z nejdůležitější a nejsložitější částí procesu byla konzervace ejakulátu a rozmrazování, kde dochází k největším ztrátám na kvalitě inseminační dávky. K získávání ejakulátu od berana se využívá metoda odběru umělou vagínou, pomocí elektroejakulace či post mortem. Nejvyužívanější metoda je pomocí umělé vagíny, jelikož je to nejpřirozenější a nejméně stresující. Méně využívanou metodou je post mortem, neboli po smrti zvířete. . Cílem této bakalářské práce bylo zaměřit se na konvenční ředidla, které byly doplněny aditivy za účelem zlepšení kvalitativních parametrů pro konzervaci beraního spermatu. Tyto látky se do ředidla přidávají i za účelem ochrany spermií během chlazení a zmrazování. Mezi nejvýznamnějšími aditivy patří antioxidanty, vitamíny, rostlinné extráty a další neméně významné aditiva. Antioxidanty chrání buňky před reaktivní formou kyslíku, a díky tomu udržují spermie ve správné fyziologické činnosti. Při použití antioxidantu astrayanthinu bylo zjištěno mnoha autory zlepšení životaschopnosti uloženého spermatu. Mezi nejhlavnější vitamíny patří vitamín E, trolox, kyselina askorbová či vitamín B12. Vitamíny jsou důležité k zachování kvality spermatu. Rostlinné extráty, které jsou například z hřebíčku, rozmarýnu, zeleného čaje, napomáhají ke zlepšení kvality. Velmi pozitivní vliv mělo také použití želatiny, která zvýšila viskozitu média a snížila pohyblivost spermií. Významnou metodou inseminace byla zjištěna intracervikální metoda, díky nízkým finančním nákladům, jednoduchosti a rychlosti provedení. Avšak nejlepších výsledků zabřezávání dosáhla metoda laparoskopická, která je však z finančního hlediska mnohem dražší a její proveditelnost je složitější i časově náročnější. Specializovanými laboratorními testy jsou počítačová metoda CASA, hypoosmotický test a průtoková cytometrie. Pomocí těchto přístrojových metod lze získat data o morfologii, motilitě, koncentraci, vitalitě spermií, dále analýza DNA a množství poškozených a mrtvých buněk.

Abstract:

The work is processed as a literature search and deals with a summary of knowledge about the processing of ejaculate and additive additives to diluents and subsequent evaluation based on field tests (insemination) or specialized laboratory tests. One of the main reasons for the low utilization of insemination in sheep farming is due to the fact that lamb ejaculate has low cryotolerance and therefore the cells have a low fertilization capacity after thawing. Preservation media are primarily typed for large ruminants. The ejaculate processing process has several stages. One of the most important and complicated parts of the process was the preservation of ejaculate and thawing, where the greatest losses in the quality of the insemination dose occur. To obtain ejaculate from the ram, the method of collection by artificial vagina, electroejaculation or post mortem is used. The most used method is using an artificial vagina, as it is the most natural and least stressful. The less used method is post mortem, or after the death of the animal. The aim of this bachelor thesis was to focus on conventional diluents, which were supplemented with additives in order to improve the quality parameters for the preservation of sheep semen. These substances are also added to the diluent to protect sperm during cooling and freezing. The most important additives include antioxidants, vitamins, plant extracts and other equally important additives. Antioxidants protect cells from a reactive form of oxygen, keeping sperm in proper physiological activity. Using the antioxidant astrayanthin, many authors have found an improvement in the viability of stored sperm. The most important vitamins include vitamin E, trolox, ascorbic acid and vitamin B12. Vitamins are important for maintaining sperm quality. Plant extracts, which are made of cloves, rosemary and green tea, for example, help to improve quality. The use of gelatin, which increased the viscosity of the medium and reduced sperm motility, also had a very positive effect. The intracervical method was found to be an important method of insemination, thanks to its low financial costs, simplicity and speed of execution. However, the best results of conception were achieved by the laparoscopic method, which is much more expensive from a financial point of view and its feasibility is more complex and time-consuming. Specialized laboratory tests are computer method CASA, hypoosmotic test and flow cytometry. Using these instrumental methods, data on morphology, motility, concentration, sperm vitality, DNA analysis and the number of damaged and dead cells can be obtained.

Keywords

ovce, inseminace, ředění ejakulátu, konzervace inseminačních dávek, ředidla

Keywords

sheep, insemination, dilution of ejaculate, conservation of insemination doses, thinners

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 22. 4. 2022

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Martin Ptáček, Ph.D.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Bachelor programme / field:
Animal Science / Animal Science