Protinádorová aktivita zprostředkovaná novými agonisty A3 receptoru

Markéta CHLUBNOVÁ

Bachelor's thesis

The anticancer activity mediated by new A3 receptor agonists.

Abstract:

Tato bakalářská práce je zaměřená na shrnutí současných znalostí o roli a účincích adenosinových receptorů s hlavním zaměřením na protinádorovou aktivitu adenosinového receptoru A3 a jeho nových agonistů. Teoretická část práce uvádí základní informace o endogenním agonistovi všech subtypů adenosinových receptorů (tedy adenosinu) a popisuje jeho roli v živých organismech jak při fyziologických, tak při patologických podmínkách, s hlavním zaměřením na rakovinu. Práce se také zabývá klasifikací rodiny adenosinových receptorů a jejích jednotlivých subtypů, poté následováno rozborem adenosinového receptoru A3 a jeho signálních drah. Poslední sekce teoretické části této práce představuje klinicky relevantní agonisty, se zaměřením především na dva nejvíce perspektivní IB-MECu a CL-IB-MECu. Nakonec je zmíněna i možná rezistence vůči léčbě A3 adenosinového receptoru. Experimentální část práce se zaměřuje na zkoumání úrovně exprese RNA a proteinů adenosinových receptorů A3 v různých rakovinových buněčných liniích. Úroveň exprese je hodnocena relativní kvantifikací komplementární DNA, imunodetekcí přítomnosti proteinového produktu A3AR a kvantitativní densitometrií. Výsledky mohou být použity při výběru vhodných linií pro další testování agonistů A3. Experimentální část odhalila genovou expresi a úroveň proteinové exprese adenosinových receptorů A3 v různých typech rakovinových buněčných linií (hematopoetických, prsních, jaterních, slinivky, tlustého střeva, plicních a kostních). Na základě těchto výsledků bylo vybráno několik buněčných linií, které mohou potencionálně sloužit jako in vitro modely pro budoucí studie protinádorových účinků zprostředkovaných novými agonisty A3 adenosinového receptoru. Vybrány byly následující buněčné linie: AsPC1, BXPC3, CAPAN-2, JOPACA-1, YAPC, PACADD119, PACADD135, PATU8902, HEPG2, HEP3B, NCI-N87, HCT116 par., HCT116 p53-/-, A549 a HCC78.

Abstract:

This bachelor thesis is focused on summarizing the current knowledge about the role and mechanism of action of adenosine receptors with the main focus on anti-cancer activity of A3 adenosine receptor and its new agonists. The theoretical part of the thesis outlines basic information about the endogenous agonist of all adenosine receptors subtypes (i.e. adenosine) and explains its role in living organisms under both physiological and pathological conditions with the main focus on cancer. The thesis also provides classification of adenosine receptor family and each of its subtype, which is followed by an examination of adenosine receptor A3 and its signaling pathways. The last section of the theoretical part of the thesis presents clinically relevant agonists, highlighting two most prospective ones - IB-MECA and CL-IB-MECA. Finally, possible resistance to A3 adenosine receptor treatment shall be introduced. The experimental part of the thesis aims to examine RNA and protein expression level of adenosine receptors A3 in various cancer cell lines. The expression level is evaluated by relative quantification of the complementary DNA, immunodetection of the presence of the A3AR protein product and by quantitative densitometry. Results could possibly help to select suitable cancer cell lines for further testing of agonists of adenosine receptor A3. The experimental part revealed gene expression and protein expression level of adenosine receptor A3 in different types of cancer cell lines (hematopoietic, mammary gland, liver, pancreatic, lung, colon and bone). Based on those results, several cell lines were pre-selected, which can serve as in vitro models for future studies of anticancer effects mediated by new adenosine receptor A3 agonists. Following cell lines were selected: pancreatic cancer cell lines: AsPC1, BXPC3, CAPAN-2, JOPACA-1, YAPC, PACADD119, PACADD135, PATU8902, liver cancer cell lines: HEPG2, HEP3B, NCI-N87, colon cancer cell lines: HCT116 par., HCT116 p53 -/- and lung cancer cell lines: A549, HCC78.

Keywords

adenosine, adenosinový receptor A3, rakovina, exprese

Jazyk práce: English

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Mgr. Jana Kotulová

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biology / Molecular and Cell Biology