Toxicita aminofenolických léčiv

Bc. Monika Brožová

Diplomová práce

The Toxicity of Aminophenolic Drugs

Anotace:

Tato práce se zabývá studiem cytotoxického působení derivátů odvozených od aminofenolu - paracetamolu, p-aminofenolu. Pro testování toxického působení derivátů byla použita lidská ledvinná buněčná linie HK-2. Toxické působení látek na buněčnou viabilitu bylo posuzováno v závislosti na jejich koncentracích a době inkubace. Změna životaschopnosti buněk po expozici toxinů byla hodnocena testem WST-1. Hladina intracelulárního glutathionu byla stanovena pomocí fluorescenční sondy monochlorobimanu s fluorometrickou detekcí. Stav aktinových vláken a buněčných jader byl sledován pomocí fluorescenčně značeného faloidinu a sondy Hoechst za použití fluorescenční mikroskopie. Buňky HK-2 byly inkubovány po dobu 4 a 24 hodin s toxiny o různé koncentraci. Z výsledků WST-1 testu vyplývá, že toxicita látek stoupá s rostoucí koncentrací a dobou inkubace. Bylo zjištěno, že snížení počtu životaschopných buněk předchází snížení koncentrace glutathionu. Z celkových výsledků vyplývá, že obě látky jsou pro HK-2 buněčnou linii toxické.

Abstract:

The thesis deals with the study of the cytotoxic effect of aminophenol derivatives - paracetamol, p-aminophenol. The human renal cell line HK-2 was used to test the toxic effects of the derivatives. The toxic effects of substances on cell viability were assessed in relation to their concentrations and incubation time. The change in cell viability after toxin exposure was assessed by the WST-1 test. The level of intracellular glutathione was determined using a fluorescent probe, i.e. monochlorobimane, with fluorometric detection. Actin filaments and cell nuclei were visualized by phalloidin and Hoechst probes, respectively, using fluorescence microscopy. HK-2 cells were incubated for 4 and 24 hours with toxins of various concentrations. The results of the WST-1 test show that the toxicity of the substances enhanced with increasing concentration and incubation time. In addition, we found that a reduction of the number of viable cells precedes reduction of glutathione concentration. The overall results show that both substances are toxic in the HK-2 cell line.

Klíčová slova

Aminofenol, cytotoxicita, glutathion, nefrotoxicita, paracetamol, viabilita.

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 7. 5. 2020

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: doc. RNDr. Tomáš Roušar, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Bioanalytik