Imunofenotypy buněk bronchoalveolární lavážní tekutiny u pacientů po transplantaci plic a jejich vztah k rejekci

Bc. Eliška VROBLOVÁ

Master's thesis

Immunophenotype of cells in bronchoalveolar lavage fluid from lung transplant patients and the relationship with rejection

Abstract:

Transplantace plic je významnou léčebnou možností pro vybranou skupinu pacientů v terminálním stádiu plicních onemocnění. Následné komplikace, kam patří různé typy rejekcí a infekcí u pacientů po transplantaci plic komplikují dlouhodobé přežívání pacientů a jsou hlavními příčinami úmrtí. Stav transplantovaného štěpu u pacientů po transplantaci plic se posuzuje na základě transbronchiální biopsie štěpu. V současné době jsou vyhledávány nové neinvazivní diagnostické metody, které by určovaly rizikové pacienty s velkým rizikem výskytu rejekcí. Jednou z možností využití je imunofenotypizace buněk bronchoalveolární lavážní tekutiny od pacientů po transplantaci plic pomocí průtokové cytometrie. V experimentální části práce byla provedena imunofenotypizace hlavních imunitních populací v bronchoalveolární lavážní tekutině odebrané pacientům po transplantaci plic neinvazivní metodou bronchoalveolární laváže. Pomocí průtokového cytometru bylo detekováno, že nejvíce zastoupenou hlavní populací imunitních buněk byly makrofágy, populace lymfocytů a neutrofilů tvořily minoritní zastoupení. Dále bylo analyzováno procentuální zastoupení populace T-lymfocytů, NK buněk, B-lymfocytů a subpopulace T-lymfocytů (CD4+ T-lymfocyty, CD8+ T-lymfocyty a CD4+ regulační T-lymfocyty) v bronchoalveolární lavážní tekutině. V diplomové práci bylo dále porovnáváno procentuální zastoupení populací imunitních buněk v bronchoalveolární lavážní tekutině u podskupin pacientů po transplantaci plic s odběrem v době akutní rejekce a bez akutní rejekce. Byly porovnány procentuální zastoupení populací imunitních buněk v bronchoalveolární lavážní tekutině a v periferní krvi. Imunocytochemickým barvením buněk byly vizualizovány vybrané znaky na populaci makrofágů na cytospinech.

Abstract:

Lung transplantation is a significant treatment option for a select group of patients having terminal lung diseases. Subsequent complications involving different types of rejections and infections in lung transplant patients prevent from long-term survival of those lung transplant patients and are the major causes of death. Status of transplant graft in lung transplant patients is assessed by transbronchial graft biopsy. New non-invasive diagnostic methods which would identify high-risk patients with a high risk of rejection are currently being sought. One of the options of the application is immunophenotyping of bronchoalveolar lavage fluid from lung transplant patients using flow cytometry. The experimental part of the thesis performs the immunophenotyping of the major immune populations in bronchoalveolar lavage fluid that was taken from lung transplant patients by a noninvasive bronchoalveolar lavage method. Using a flow cytometer, it was detected that the most abundant major population of immune cells were macrophages, lymphocyte and neutrophil populations were minor. Furthermore, the percentage of T-lymphocytes, NK cells, B-lymphocytes and T-lymphocyte subpopulations (CD4+ T-lymphocytes, CD8+ T-lymphocytes and CD4+ regulatory T-lymphocytes) was analyzed in bronchoalveolar lavage fluid. Furthermore, the percentage of immune cell populations in bronchoalveolar lavage fluid was compared in subgroups of lung transplant patients with acute rejection and no acute rejection. The percentages of immune cell populations in bronchoalveolar lavage fluid and peripheral blood were compared.

Keywords

Transplantace plic, imunofenotypizace, imunitní buňky, bronchoalveolární laváž, bronchoalveolární lavážní tekutina, cytospiny

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 29. 4. 2019

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Zuzana Mikulková, Ph.D.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Biochemistry