Ovlivnění makrofágů myeloperoxidázou in vitro

Mgr. Hana Martišková, Ph.D.

Bachelor's thesis

Effect of myeloperoxidase on macrophages in vitro

Anotácia:

Makrofágy hrají klíčovou roli nejen v nespecifické imunitní obraně organismu, ale také v řadě zánětlivých onemocnění. V místě zánětu se kumuluje enzym myeloperoxidasa (MPO), která je uvolňována zejména z neutrofilních granulocytů. Bylo prokázáno, že MPO může působit na některé typy leukocytů stimulačně bez ohledu na její enzymatickou aktivitu. Avšak role MPO v aktivaci tkáňových makrofágů zůstává stále sporná. Cílem této práce bylo proto objasnit, zda MPO stimuluje makrofágy k expresi inducibilní syntasy oxidu dusnatého (iNOS) a k produkci oxidu dusnatého (NO) jako ukazatele aktivace těchto buněk. Výsledky mých experimentů ukazují, že MPO v rozsahu koncentrací od 0,5 µg/ml do 5 µg/ml a v čase do 48 hodin neaktivuje klidové makrofágy linie RAW 264.7 a linie MHS k expresi iNOS, a tím pádem ani k produkci NO. Naopak z výsledků vyplývá, že má MPO mírný inhibiční vliv na expresi iNOS i produkci NO již aktivovanými makrofágy linie RAW 264.7 i linie MHS. Získané výsledky budou využity pro následující bližší zkoumání molekulární podstaty modulace aktivace makrofágů MPO.

Abstract:

Macrophages play the key role in nonspecific immune defense of organism but also in several inflammatory diseases. Myeloperoxidase enzyme (MPO), which is released in particular from neutrophil granulocytes, cumulates at the site of inflammation. It was demonstrated that MPO may have stimulative effect on some types of leukocytes regardless of its enzymatic activity. However, the role of MPO in tissue macrophage activation remains contentious. The target of this thesis was to clarify if MPO stimulates macrophages to inducible intric oxide (iNOS) expression and nitric oxide (NO) production as a marker of their activation. Findings of my experiments show that MPO ranging in concentration from 0,5 µg/ml to 5 µg/ml and at the time to 48 hours does not activate resting macrophage cell line RAW 264.7 and cell line MHS to iNOS expression and thus not even NO production. Conversely, it emerged that MPO has moderate inhibitory impact on iNOS expression and NO production by activated macrophage cell line RAW 264.7 and cell line MHS. Obtained results will be used for following more detailed studies of molecular principle of MPO-mediated macrophage activation state modulation.

Kľúčové slová

makrofágy, oxid dusnatý, inducibilní syntasa oxidu dusnatého, myeloperoxidasa, macrophages, nitric oxide, inducible nitric oxide synthase, myeloperoxidase

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2010

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 6. 2010
• Vedúci: doc. Mgr. Lukáš Kubala, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry