Krevní paraziti rejnoků na Svalbardu

Anežka JAKEŠOVÁ

Bachelor's thesis

Blood parasites of ray from Svalbard

Abstract:

Tato bakalářská práce se zabývá poznatky krevních parazitů ryb a paryb. V tomto případě zejména rejnoka Amblyraja radiata. Krevní nátěry ryb a paryb pro tuto studii byly získány ze Svalbardu, kterým se zabývám v úvodu. V teoretické části popisuji rozdělení paryb, dále popisuji obecně parasitismus. V dalším popisu zmiňuji krevní parazity, motolice a hlístice které se také mohou objevovat v krvi obratlovců. Mezi krevní parazity patří i Haemogregarina delagei, který je jediným parazitem nalezeným na krevních roztěrech rejnoka A. radiata, a Desseria myoxocephali u vranky Myoxocephalus scorpius. Na Svalbardu jsou A. radiata infikovány H. delagei s vysokou prevalencí (90 %). V praktické části jsem se zabývala všemi kroky vedoucími k získání části sekvence genu pro 18S rRNA. Vyizolovanou DNA z krve rejnoků jsem přidala do několika různých směsí PCR, které se lišily použitou polymerázou, pufrem nebo primery. Velikost získaných PCR produktů jsem posoudila pomocí agarózové elektorofézy, izolovala je pomocí komerčního typu (Expin Combo, GeneAll) a zaslala na přímé sekvenování firmě Seqme nebo použila pro molekulární klonování. Úspěšně zaklonované úseky DNA jsem izolovala z kompetentních buněk pomocí kitu (Hybrid-Q Plasmid, GeneAll) a nechala opět sekvenovat v servisní firmě Seqme. Sekvence toho parazita jsou nejblíže k Desseria myoxocephali a nasvědčují hypotéze, že Haemogregarina není monofyletickým rodem.

Abstract:

This Bachelor's thesis is about blood parasites of fish and chondrichthyes. In this case especially thorny skate Amblyraja radiata. Blood smears of fish and chondrichthyes for this thesis were obtained from Svalbard, which I deal with at the beginning. In the theoretical part, the division of the chondrichthyes as well as parasitism in general are descibed. In the followinf description I mentioned blood parasites, trematodes and nematodes, which can also appear in the blood of the vertebrates. The blood parasites aslo includes Haemogregarina delagei, which is the only parasite found on blood smears of thorny skate Amblyraja radiata and Desseria myoxocephali on fish Myoxocephalus scorpius. A. radiata are infected by H.delagei in high prevalence (90 %) on Svalbard. In the practical part, I have dealt with all the steps to gain part of the gene 18S rRNA. Isolated DNA from ray blood was added in several different mixtures PCR products, which were different by polymerase buffer or primers. I obtained the size of the PCR products by agarose electrophoresis, isolated by commercial type (Expin Combo, GeneAll) and sent to the Seqme company for a direct sequencing, or I used it for molecular cloning. I isolated well-cloned DNA segments from competent cells by using a kit (Hybrid-Q Plasmid, GeneAll) and sequenced in the Seqme service company again.Obtained sequencies are similar to Desseria myoxocephali, and it reflects the hypothesis, that Haemogregarina is not monophyletic genus.

Keywords

Krevní paraziti, Rybí paraziti, Svalbard, Amblyraja radiata, Haemogregarina delagei

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2017

Thesis defence

• Supervisor: doc. RNDr. Oleg Ditrich, CSc.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician