Citlivé detekční metody pro stanovení vitamínu K v biologickém vzorku

Bc. Vendula Michalicová

Master's thesis

Sensitive vitamin K detection in biological samples

Abstract:

Tato diplomová práce je zaměřena na vývoj HPLC metody s fluorescenční detekcí a elektrochemickou redukcí pro stanovení vitamínu K1 a jedné z forem vitamínu K2 (MK-4) v lidské plasmě. V teoretické části jsou popsány fyzikálně-chemické vlastnosti vitamínu K, jeho fyziologická úloha v organismu a také jeho role v onemocněních. V této části jsou dále shrnuty publikované metody pro stanovení těchto vitamínů. Praktická část se zabývá optimalizací této metody na základě odborných publikací a testování jednotlivých podmínek separace. Jsou zde uvedeny základní validační parametry a aplikace zvolené metody na reálné vzorky plasmy. Na závěr je diskutována vhodnost parametrů nastavených v této práci a jsou nabídnuty způsoby, kterými by mohlo být dosaženo zlepšení na různých úrovních analytického procesu.

Abstract:

This Master’s thesis is focused on the development of HPLC method with fluorescence detection and electrochemical reduction for the determination of vitamin K1 and one of the forms of vitamin K2 (MK-4) in human plasma. The theoretical part describes the physicochemical properties of vitamin K, its physiological role in the human body and its role in diseases. This part also summarizes methods for the determination of these vitamins published in the literature. The practical part deals with the optimization of this method based on the published literature and testing of individual separation conditions. The basic validation parameters and application of the selected conditions to real plasma samples are presented here. Finally, the suitability of these parameters is discussed, and ways in which improvements could be achieved at different levels of the analytical process are offered.

Keywords

K1, MK-4, HPLC, fluorescenční detekce, elektrochemická redukce, lidská plasma, fluorescence detection, electrochemical reduction, human plasma

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 19. 5. 2022

Thesis defence

• Date of defence: 20. 6. 2022
• Supervisor: Mgr. Marta Pelcová, Ph.D.
• Reader: Mgr. Jindra Smutná, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Bioanalytical Laboratory Diagnostics in Medicine - Bioanalytic / Bioanalytical Laboratory Diagnostics in Medicine - Bioanalyst