Vliv aktivity enzymu na inhibiční účinnost vybraných inhibitorů

Bc. Adéla Špásová

Master's thesis

The effect of enzyme activity on inhibitory efficiency of selected inhibitors

Abstract:

Acetylcholinesteráza je enzym, jenž hraje důležitou roli v ukončení přenosu nervového vzruchu prostřednictvím hydrolýzy acetylcholinu. Porucha přenosu signálu pomocí tohoto neuromediátoru může být příčinou mnohých onemocnění. Proto je v takovém případě nutno zamezit jeho rozkladu, k čemuž lze využít inhibitory cholinesteráz, vystupující tedy jako léčiva. Inhibitory cholinesteráz se mimo jiné používají i jako pesticidy či dokonce chemické bojové prostředky. Ve své práci jsem se zaměřila na testování inhibičního účinku vybraných inhibitorů acetylcholinesterázy. Sledováním poklesu aktivity enzymu byla stanovena inhibiční koncentrace, kinetické parametry enzymatické reakce, míra a typ inhibice, a to pomocí spektrofotometrické Ellmanovy metody. Pro inhibitory byly vypočteny hodnoty rovnovážné disociační konstanty, rozdělovací koeficient a polární povrchová plocha molekuly. Kinetické parametry a typ inhibice byly vyhodnoceny pomocí grafického znázornění dle Lineweavera a Burka a dle Dixona.

Abstract:

Acetylcholinesterase is an enzyme which plays an important role in ending the transmission of nerve impulse by hydrolysis of acetylcholine. Failure of transmission signal with this neuromediator may be the cause of many illnesses. Therefore, in this case it is necessary to prevent its decomposition, for which the cholinesterase inhibitors can be used as drugs. Cholinesterase inhibitors are also used as pesticides or even chemical weapons. I focused on testing the inhibitory effect of selected acetylcholinesterase inhibitors in this thesis. By monitoring the decrease in enzyme activity the inhibitory concentration, kinetic parameters of the enzymatic reaction, rate and type of inhibition were determined by spectrophotometric Ellman's method. Values of equilibrium dissociation constant, partition coefficient and polar surface area of the molecule were calculated for all of inhibitors. Kinetic parameters and type of inhibition were evaluated using Lineweaver-Burk and Dixon graphical addictions.

Keywords

acetylcholinesteráza, Alzheimerova choroba, inhibitory, kinetické parametry

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 10. 5. 2018

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Katarína Vorčáková, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Bioanalyst