DNA sekvenční motivy ovlivňující expresi transgenu

Mgr. Ivana Žváčková

Bachelor's thesis

DNA sequence motifs influencing transgene expression

Anotácia:

S rozvojem rostlinných transformačních technologií byl výzkum soustředěn na umělé konstrukty schopné zvyšovat transgenní expresi. Tyto konstrukty musí být po vnesení do hostitelského organismu schopny ovlivnit stabilitu inzerce a zvyšovat transgenní expresi. Na základě těchto požadavků bylo zkoumáno několik transformačních mechanismů a DNA sekvencí. Bylo prokázáno, že existují DNA sekvence schopné izolovat integrovaný transgen od okolních sekvencí, a tím zvyšovat transgenní expresi. Schopnost ovlivnit transgenní expresi mají také některé promotory a introny. U těchto elementů výsledek závisí na použitém promotoru, nebo intronu a také cílovém druhu. Důležité je také vyhodnocování transgenní exprese, které je u rostlin možné pomocí zeleného fluorescenčního proteinu a β- glukuronidázového fúzního systému.

Abstract:

With the development of plant transformation technologies, the reseach has focused on the artificial constructs capable of increasing transgene expression. After the introduction into a host organism, these contructs have to be able to influence insertion stability and to enhance transgene expression as well. Based on these requirements, several DNA sequences and transformation mechanisms have already been examined. It has been proved, that there are DNA sequences capable of isolating the integrated transgene from nearby sequences and thus increase transgene expression. Some promoters and introns also have the ability to influence transgene expression. Regarding these elements, the results vary depending on target species, promoter and intron used. The evaluation of transgene expression is also important. In plants, this is possible by using green fluorescence protein and β- glucuronidase fusion system.

Kľúčové slová

regulace genové exprese, IME, MAR, promotor, reportérové geny, transgenní rostliny, regulation of gene expression, promoter, reporter genes, transgene plants

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 18. 6. 2012
• Vedúci: Mgr. Eva Sýkorová, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biology / Molecular Biology and Genetics