Studium thiopurin S-methyltransferázy u dětských onkologických

Bc. Eva Bodišová

Bachelor's thesis

The study of thiopurin S-methyltransferase in pediatric cancer patients

Abstract:

Thiopurinové deriváty jsou široce používány pro léčbu akutní leukémie, pro imunosupresivní léčbu pacientů po orgánové transplantaci a pro léčbu chronických zánětlivých onemocnění. Aromatické a heterocyklické sulfhydrylové komponenty thiopurinových léčiv, včetně 6-thioguaninu, 6-merkaptopurinu a azathioprinu, jsou metabolizovány v organizmu přes S-metylaci, katalyzovanou enzymem přítomným v cytosolu - thiopurin S-metyltransferázou (TPMT). Dostatečná aktivita TPMT hraje klíčovou roli při biodegradaci thiopurinů, které určují efekt léčiv a vznik vedlejších nežádoucích účinků při jejich odbourávání jako je neurotoxicita, hepatotoxicita, myelosuprese a záněty sliznic. Snížená metabolická aktivita enzymu TPMT je důsledkem přítomnosti funkčních polymorfismů v kódující oblasti genu TPMT, z nichž mezi nejčastější deficitní alely v evropské populaci patří TPMT*2, TPMT*3A a TPMT*3C a méně častá TPMT*3B. Klinické projevy deficitu TPMT mohou být závažné pro pacienty, kteří jsou heterozygoty nebo homozygoty pro funkčně variantní alely. V současné době vyšetření TPMT patří mezi doporučovanou součást farmakogenetického algoritmu pro individualizaci dávek léčiva před podáním thiopurinových léčiv, zvláště u dětských onkologických pacientů při léčbě akutní lymfoblastické leukémie. V MOÚ jsme zavedli genotypizaci sledovaných mutací pomocí metody real-time PCR, která je v současné době k dispozici jako klinický test. Genotypizace TPMT tvoří součást komplexního farmakogentického vyšetření pacienta prováděného na OLM MOÚ ve spolupráci OKBH, FN Brno - PDM, které se zabývá fenotypizací TPMT.

Abstract:

Thiopurine drugs are widely used to treat acute lymphoblastic leukemia, autoimmune disorders, inflammatory bowel disease and organ transplant recipients. These drugs, such as 6-mercaptopurine, 6-thioguanine and azathioprine, are metabolized, in part, by S-methylation catalyzed by the cytoplasmic enzyme thiopurine methyltransferase (TPMT). Patients who inherited intermediate and very low levels of TPMT activity are at greatly increased risk for thiopurine induced toxicity such as myelosuppression, hepatotoxicity, neurotoxicity or inflammatory mucositis, when treated with standard doses of these drugs. Varying levels of enzyme activity have been associated with functional polymorphisms in the TPMT gene. The most prevalent TPMT alleles, namely TPMT *2, *3A, *3C and *3B, account for 80 – 95% of the intermediate and low enzyme activity. Prior to starting thiopurine therapy, determination of TPMT activity is necessary for appropriate adjustment of thiopurine drug doses. We developed and implemented genotyping of the most prevalent TPMT alleles using real-time PCR for routine use in laboratory of Department of Laboratory Medicine, Masaryk Oncology Institute. Comprehensive pharmacogenetic testing of TPMT that combine genotyping and phenotyping provides more complex information of TPMT activity/deficiency.

Keywords

Farmakogenetika, thiopurin S-methyltransferáza, TPMT, real-time PCR

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 10. 5. 2010

Thesis defence

• Date of defence: 9. 6. 2010
• Supervisor: Mgr. Martina Vyskočilová, Ph.D.
• Reader: doc. MUDr. Regina Demlová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specializations in Health Science / Laboratory Assistant