Detekce intracelulárních fosfo-proteinů a jejich význam u mnohočetného myelomu

Bc. Klára Pázmanová

Bachelor's thesis

Detection of intracellular phospho-proteins and their significancy in multiple myeloma

Abstract:

Intracellular signalling pathways form complex communication network, that transfer signals from several surface receptors to the nucleus, where activation of particular genes takes place. Detection of intracellular phosphoproteins allows evaluation of signalling network including analysis of deregulated signalling pathways in various oncologic conditions. Multiple myeloma (MM), characterized by the presence of clonal plasmocytes, is a hematologic malignancy that evolves through a multistep process consisting of changes on the level of molecules as well as single cells. Following changes in signalization may then be reflected in the formation of MM, as well as in the response to therapy, and serve as means to further knowledge on pathophysiology of MM. For detection of these changes, methods such as western blotting, mass spectrometry, or flow cytometry are used. Application of intracellular flow cytometry in the form of so-called phospho-flow allows detection on the level of single-cells, therefore it is possible to focus specifically on the nature of clonal plasmocytes or other involved cell subpopulations. New findings in the area of cell signalization can serve for development of targeted therapies that inhibit specific signalling pathways involved, for instance, in proliferation or apoptic resistance of myeloma cells.

Abstract:

Intracelulárne signalizačné dráhy predstavujú zložitú komunikačnú sieť, ktorá prenáša signály z mnohých povrchových receptorov do jadra, kde dochádza k aktivácii určitých génových cieľov. Detekcia intracelulárnych fosfo-proteínov umožňuje štúdium signalizačnej siete vrátane analýzy deregulovaných signálnych dráh pri rôznych onkologických ochoreniach. Mnohonásobný myelóm (MM) je hematologická malignita vyznačujúca sa prítomnosťou klonálnych plazmocytov, ktorá vzniká mnohokrokovým procesom zahrňujúcim zmeny na molekulárnej aj bunkovej úrovni. Následné zmeny v signalizácii sa potom môžu odrážať na vzniku vlastného MM, ako aj v reakcii na liečbu, a slúžiť tak k ďalšiemu poznaniu patofyziológie MM. Na detekciu týchto zmien sa používajú metódy western blotting, hmotnostná spektrometria, alebo prietoková cytometria. Intracelulárna prietoková cytometria vo forme tzv. fosfo-flow je schopná analyzovať zmeny fosforylácie na úrovni jednotlivých buniek, a teda umožňuje zamerať sa priamo na klonálne plazmocyty či ďalšie zúčastnené bunkové subpopulácie. Nové poznatky v oblasti bunkovej signalizácie potom môžu slúžiť k vývinu cielených liečiv zameraných na inhibíciu špecifických signálnych dráh uplatňujúcich sa napr. v proliferácii či apoptickej rezistencii myelómových buniek.

Kľúčové slová

signálne dráhy, prietoková cytometria, mnohonásobný myelóm, fosfo-flow metóda

Jazyk práce: Slovak

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 9. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 12. 6. 2017
• Vedúci: Mgr. Lucie Říhová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Experimental Biology / Molecular Biology and Genetics