Characteristcs of cytoplasmic parameters in porcine oocytes during folliculogenesis

Ing. Ing. Irena Milaković

Doctoral thesis

Charakteristika cytoplasmatických parametrů prasečích oocytů v průběhu folikulogeneze

Abstract:

V práci byly studovány charakteristiky energetického statutu prasečích oocytů ve vztahu k jejich meiotické kompetenci a zrání in vitro. Jako dárkyně oocytů byly využity cyklující pubertální prasničky od časné luteální do časné folikulární fáze ovariálního cyklu. Oocyty izolované ze středních folikulů (MF) byly posouzeny jako s vyšší meiotickou kompetencí a oocyty z malých folikulů (SF) jako s nižší meiotickou kompetencí. Oocyty před a po zrání byly vyšetřeny pomocí metod konfokální mikroskopie, bioluminiscenčního testu a Western blottingu. Byly provedeny čtyři experimenty, každý ve třech replikách, k vyhodnocení jak MF tak SF oocytů ve smyslu výskytu metabolických jednotek tvořených mitochondriemi a lipidy, spotřeby ATP a lipidů a výskytu tukových kapének s přítomností adipose differentiation-related proteinu (ADRP). Práce odhalila specifické rozdíly v energetických vlastnostech prasečích oocytů s různou meiotickou kompetencí. Oocyty s vyšší meiotickou kompetencí jsou pokročilejší ve tvorbě energetických rezerv před zráním, zatímco oocyty s nižší meiotickou kompetencí jsou aktivnější v doplňování energetických zásob během zrání.

Abstract:

The characteristics of energy status in porcine oocytes as related to their meiotic competence and in vitro maturation were studied. Cycling pubertal gilts in the early luteal to the early follicular phases of the ovarian cycle were used as oocyte donors. The oocytes recovered from medium (MF) or small follicles (SF) were considered meiotically more or less competent, respectively. The oocytes were examined before or after maturation by confocal microscopy, a bioluminescent cell assay and Western blotting. Four experiments, each in triplicate, were performed to assess both SF and MF oocytes in terms of metabolic units formed by mitochondria and lipids, ATP and lipid consumption and lipid droplets with adipose differentiation-related protein (ADRP) expression. In conclusion, specific differences in energy characteristics between porcine oocytes with different meiotic competence were found. Meiotically more competent oocytes are more advanced in terms of energy reserves before maturation, while meiotically less competent oocytes are more active in replenishing energy stores during maturation.

Keywords

oocyt, folikulogeneze, vaječníky

Keywords

folliculogenesis, oocyte, ovaria

Language used: English

Date on which the thesis was submitted / produced: 23. 9. 2016

Thesis defence

• Supervisor: prof. Ing. Ladislav Máchal, DrSc.

Mendel University in Brno

Faculty of AgriSciences

Doctoral programme / field:
Animal Breeding / Applied Animal Breeding