Vyšetření karyotypu z plodové vody

Pavlína MOULEOVÁ

Bachelor's thesis

Examination of the karyotype from amniotic fluid

Abstract:

Ve své bakalářské práci se zabývám vyšetřením karyotypu z plodové vody. Vyšetření karyotypu z plodové vody, která je získávána amniocentézou, je považováno za základní metodu prenatální diagnostiky. Díky tomuto vyšetření je možné potvrdit nebo naopak vyloučit chromozomální aberace plodu. Amniocentéza je invazivní metoda získání plodové vody. Riziko komplikací spojených s odběrem, jako je například potrat nebo předčasný odtok plodové vody, se pohybuje okolo 0,5-1 %. Indikaci k amniocentéze provádí genetik nejčastěji na základě pozitivních výsledků screeaningových vyšetření. Samotný odběr se provádí mezi 16. až 18. týdnem těhotenství. Vlastní kultivace a následné zpracování preparátu se obvykle pohybuje mezi 10-17 dny, proto je velice důležitý termín pro provedení odběru. Z odebrané plodové vody jsou centrifugací odděleny buňky. Ty jsou nasazeny do kultivačního média, kde dorostou do potřebného množství. Na konci kultivační doby je jejich dělení zablokováno v metafázi mitotického dělení přidáním colcemidu. Následuje zpracování pro mikroskopické zobrazení, jehož součástí je hypotonie, fixace a vytvoření nativních preparátů, které se barví nejčastěji technikou podle Giemsy-Romanowského pro G-pruhování. Poté se tyto vzorky hodnotí ve světelném mikroskopu s použitím počítačového karyotypovacího systému. Během stáže v laboratoři Genetiky ? Plzeň s.r.o. jsem provedla měření 50 vzorků plodové vody. Z tohoto počtu bylo 48 vzorků s negativním nálezem (to znamená, že měli normální karyotyp) a 2 vzorky s pozitivním nálezem. Jedním z nálezů byla trizómie na 21. chromozómu, která je charakteristická pro Downův syndrom. Druhým nálezem byla reciproká translokace, která byla navíc dourčena metodou FISH.

Abstract:

My bachelor work is focused on the examination of the karyotype from amniotic fluid. The examination of the karyotype from amniotic fluid being obtained by amniocentesis is a basic method of prenatal diagnostics. It is possible to confirm or exclude fetal chromosomal aberrations with this examination. Amniocentesis is an invasive method of obtaining amniotic fluid. The risk of complications associated with amniocentesis, such as a miscarriage or a premature rupture, is around 0.5-1%. The indication for amniocentesis is performed by a geneticist, mostly on the basis of positive results of screening examinations. Amniocentesis itself is done between the sixteenth and eighteenth week of pregnancy. The self cultivation and the following processing of the preparation is usually between 10-17 days, therefore it is very important to set a term for this amniocentesis. Cells are separated by centrofugation from amniotic fluid. After that these are seeded in a culture medium where they grow to the required amount. At the end of the cultivation period, the division of cells is blocked in the metaphase of mitotic division by adding Colcemid. This is followed by processing for the microscopic views which includes hypotonia, fixation and the creation of native preparations which are stained most frequently by Giemsa - Romanovsky technique for G-banding. The these samples are evaluated in the light microscope with using a computer karyotyping system. During the stage in the laboratory Genetics - Plzeň s.r.o., I took the measurements of 50 samples of amniotic fluid. Forty-eight samples of all these were negative ( it menas that they had a normal karyotype) and 2 samples were positive . One of them was trisomy of the 21st chromosome, which is characteristic of Down syndrome. The second one was the reciprocal translocations, which was determined by FISH.

Keywords

Karyotyp, amniocentéza, chromozóm.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2012

Accessible from:: 3. 5. 2012

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Miloš Velemínský, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician