Vývoj a charakteristika linií rezistentních k purinovým a pyrimidinovým cytostatikům

Bc. Kateřina JEČMEŇOVÁ

Diplomová práce

Development and characterization of resistant cell lines to purine and pyrimidine cytotoxic drugs

Anotace:

Diplomová práce se věnuje vývoji a charakteristice rezistentních linií na purinová (6-merkaptopurin, 6-thioguanin, fludarabin, roskovitin) a pyrimidinová (gemcitabin, 5-fluorouracil, cytarabin) cytostatika. Teoretická část práce je věnována molekulárním mechanismům účinku purinových a pyrimidinových cytostatik, která se v klinické praxi využívají k léčbě leukémií a solidních nádorů. Rešerše rovněž obsahuje popis obecných mechanismů rezistence na cytostatická léčiva se zaměřením na nukleosidové deriváty. Experimentální část práce je zaměřena na selekci rezistentních buněk na purinová a pyrimidinová cytostatika. Rezistence byla ověřena pomocí MTS testu cytotoxicity a následně byla provedena základní charakteristika selektovaných buněk. Průtokovou cytometrií byla analyzovaná exprese P-glykoproteinu a MRP1, pomocí funkčního testu byla otestována aktivita nukleosidových transportérových proteinů. Na závěr byla na vyselektovaných rezistentních liniích otestována nová potencionální protinádorová léčiva.

Abstract:

This master thesis deals with the development and characteristics of cell lines resistant to purine (6-mercaptopurine, 6-thioguanine, fludarabine, roscovitine) and pyrimidine (gemcitabine, 5-fluorouracil, cytarabine) cytostatics. The theoretical part of this thesis focuses on molecular mechanisms of the effect of purine and pyrimidine cytostatics that are in the clinical practice used for the treatment of leukaemia and solid tumors. The review also describes general mechanisms of resistance to cytostatic drugs with the focus on nucleoside derivates. The experimental part of the work is aimed at the selection of cells resistant to purine and pyrimidine cytostatics. The cells were subsequently characterized. The expression of P-glycoprotein and MRP1 was analyzed by flow cytometry, and the activity of nucleoside transporter proteins was tested by a functional assay. Finally, new potential anticancer drugs were tested on selected resistance lines.

Klíčová slova

rezistence, mnohočetná léková rezistence, nukleosidy, 6-merkaptopurin, 6-thioguanin, cytarabin, fludarabin, roskovitin, 5-fluorouracil, gemcitabin

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 20. 5. 2020

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: MUDr. Petr Džubák, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Molekulární a buněčná biologie