Využití různých expresních systémů pro přípravu rekombinantních glykosyltransferas

Bc. Dana Svobodová

Diplomová práce

Expression of recombinant glycosyltransferases using various expression systems

Anotace:

Tuberculosis is the leading infectious disease cause of death and its victims represent more than a quarter of the world's preventable deaths. Mycobacterium tuberculosis is the bacterium that causes most cases of tuberculosis. Glycosyltransferases are enzymes, which are participant in bind cell wall of Mycobacterium tuberculosis and play an essential role in life strategy of this bacterium. Rv0225 and Rv3782 are possible glycosyltransferases from bacterium Mycobacterium tuberculosis. The aim of this project is gaining the studied glycosyltransferases in recombinant form, as pure as possible, in order to perform the structural and functional characterization. Understanding the structure-functional relations and the mechanism of glycosyltransferase catalysis is important for designing ways of inhibition of the Mycobacterium tuberculosis glycosyltransferases, a potential great help in treatment of tuberculosis.

Abstract:

Celá třetina lidské populace v sobě v současnosti nosí bakterii Mycobacterium tuberculosis, která je původce infekčního onemocnění tuberkulózy. Léčba této nemoci je velmi obtížná hlavně díky specifickému složení buněčné stěny této bakterie. Glykosyltransferasy jsou enzymy, které mimo jiné zabudovávají do buněčné stěny M. tuberculosis unikátní cukerné zbytky, jejichž vazby jsou pro lidský organismus velmi obtížně štěpitelné. Glykosyltransferasy tedy hrají klíčovou roli pro přežití bakterie. Případnou inhibicí těchto enzymů u Mycobacterium tuberculosis by mohl být učiněn výrazný posun v léčbě tuberkulózy. Cílem mé práce je aplikace technologie exprese za snížení teploty pro expresi rekombinantních glykosyltransferas Rv3782 a Rv0225 v kompetentních buňkách ArcticExpress, dále purifikace a následné studie rekombinantních glykosyltransferas.

Klíčová slova

tuberkulosa, glykosyltransferasy, buněčná stěna, rekombinantní protein, exprese za snížené teploty

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 6. 2008

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 10. 6. 2008
• Vedoucí: prof. RNDr. Michaela Wimmerová, Ph.D.
• Oponent: doc. RNDr. Oldřich Janiczek, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie