Interakce extracelulárních vezikul produkovaných druhem Enterococcus faecium s hostitelskými buňkami

Bc. Lucia Caleková

Bachelor's thesis

Interaction of Enterococcus faecium-derived extracellular vesicles with host cells

Abstract:

Extracellular vesicles are one of the main forms of intercellular communication. They are spherical structures of a lipid manner, produced by all cell types, delivering bioactive molecules to the acceptor cells. Because of this, extracellular vesicles are potentially useful in medicine, for instance as drug carriers or therapeutics. Due to the easier cultivation of mother cells and higher yields, bacterial extracellular vesicles are more advantageous than eukaryotic vesicles for potential therapeutical purposes. However, for their full utilisation in clinical practice there is still information missing about the processing by their acceptor cell. The aim of this thesis was to observe the interaction of bacterial extracellular vesicles with host cells. For that, extracellular vesicles of the bacterial strain Enterococcus faecium CCM 7167T were isolated, biophysically characterized, fluorescently stained and their interaction with murine macrophage cell line RAW 264.7 was observed by confocal microscopy. This work provides a summary of current literature about bacterial extracellular vesicles and the results of the experimental part show the successful observation of interaction of isolated vesicles with RAW 264.7 cells.

Abstract:

Jednou z hlavných foriem medzibunkovej komunikácie sú extracelulárne vezikuly, sférické útvary lipidovej povahy, produkované všetkými typmi buniek. Tieto štruktúry sú schopné doručiť bioaktívne molekuly, ktoré nesú, do akceptorových buniek. Pre tieto vlastnosti sú extracelulárne vezikuly potenciálne využiteľné v medicíne, napríklad ako nosiče liečiv či terapeutiká. Bakteriálne extracelulárne vezikuly sú vďaka jednoduchšej kultivácii materských buniek a vyššej výťažnosti na tieto účely výhodnejšie oproti eukaryotickým. Pre ich plné využívanie v klinickej praxi však chýba dostatok informácií o ich spracovaní akceptorovou bunkou. Táto práca sa zaoberá interakciou bakteriálnych extracelulárnych vezikúl s hostiteľskými bunkami sledovanou pomocou konfokálnej mikroskopie. Na pozorovanie interakcie boli v experimentálnej časti práce využité extracelulárne vezikuly bakteriálneho kmeňa Enterococcus faecium CCM 7167T. Extracelulárne vezikuly boli izolované, biofyzikálne charakterizované, fluorescenčne nafarbené a bola pozorovaná ich interakcia s bunkovou líniou myších makrofágov RAW 264.7. Výstupom tejto práce bolo zhrnutie informácií o bakteriálnych extracelulárnych vezikulách v literárnej rešerši a úspešné pozorovanie interakcie izolovaných vezikúl s bunkami RAW 264.7.

Keywords

bakteriálne extracelulárne vezikuly, Enterococcus faecium, interakcia s hostiteľskou bunkou, konfokálna mikroskopia, intracelulárny osud bacterial extracellular vesicles, interaction with the host cell, confocal microscopy, intracellular fate

Language used: Slovak

Date on which the thesis was submitted / produced: 16. 5. 2023

Thesis defence

• Date of defence: 22. 6. 2023
• Supervisor: Mgr. Miriam Sandanusová
• Reader: Mgr. Jana Lapinová

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Experimental and Molecular Biology / Experimental Animal Biology and Immunology